Différence clé - CFU vs MPN
L'unité formant colonie (UFC) et le nombre le plus probable (MPN) sont deux méthodes utilisées pour dénombrer les micro-organismes dans les échantillons. Les deux paramètres sont utilisés pour détecter la qualité de l'eau et les bactéries indicatrices fécales dans les échantillons d'eau. L'unité formant colonie est une mesure utilisée pour dénombrer le nombre de cellules bactériennes viables ou de cellules fongiques dans un volume ou un poids spécifique d'un échantillon donné. L'unité standard pour ce paramètre est UFC/ml ou UFC/g. Le nombre le plus probable est une autre unité utilisée pour mesurer le nombre de cellules bactériennes viables dans un échantillon liquide. le différence clé entre CFU et MPN est que CFU est calculé à partir des colonies bactériennes et fongiques se développant sur une plaque de gélose solide tandis que MPN est calculé à partir de bactéries viables se développant dans un milieu liquide.
Qu'est-ce que l'UFC ?
L'unité formant colonie (UFC) est un paramètre qui mesure le nombre de cellules bactériennes ou fongiques viables dans un échantillon donné. La méthode qui compte les unités formant des colonies est appelée comptage sur plaque standard. Les colonies viables qui apparaissent sur les plaques de gélose sont exprimées en UFC pour 1 ml (unité formant colonie par millilitre) d'échantillon pour les liquides ou en UFC pour 1 g (unité formant colonie par gramme) d'échantillon pour les solides.
Il existe deux méthodes courantes utilisées pour mesurer l'UFC dans un échantillon. Il s'agit de la méthode de la plaque étalée et de la méthode de la plaque de coulée. Ces deux méthodes sont soutenues par une technique appelée dilution en série. Les échantillons dilués en série permettent d'obtenir un nombre dénombrable de colonies sur la surface de la gélose. Un volume connu d'échantillon peut être étalé sur la surface d'une plaque de gélose, ou mélangé avec de la gélose et versé sur une plaque. La plaque est ensuite incubée et les colonies qui apparaissent sont comptées. Le nombre de colonies se rapporte au nombre de micro-organismes dans l'échantillon d'origine. Les plaques qui montrent trop de colonies ou trop peu de colonies sont exclues du comptage car les résultats peuvent ne pas être statistiquement exacts sur ces plaques. Statistiquement, la meilleure plage est de 30 à 300 colonies sur une plaque de gélose. Par conséquent, les plaques correctes doivent être sélectionnées pour un dénombrement précis. La dilution en série est effectuée pour la fonction ci-dessus.
Une fois que vous avez compté le nombre de colonies viables sur les plaques, les UFC/ml peuvent être calculées à l'aide de l'équation suivante.
CFU par ml d'échantillon original=nombre de colonies sur une plaque X facteur de dilution
Facteur de dilution=(1/ Dilution de la plaque)
Par exemple, si vous obtenez 149 colonies sur la plaque de la dilution 10-4, alors le nombre de bactéries dans 1 ml de l'échantillon d'origine peut être calculé comme suit:
UFC/ml=(149) x (1/10-4)
=149 × 104 ou 1490000
=1. 49 x 106
Figure 01: Unité formant colonie
Qu'est-ce que MPN ?
Le nombre le plus probable est une mesure alternative à CFU/ml. MPN estime également les cellules viables dans un échantillon liquide. Elle compte les organismes qui poussent dans une culture liquide et est une technique essentiellement bactériologique. Cette méthode est particulièrement utile pour les échantillons qui contiennent de faibles concentrations de cellules bactériennes; par exemple, lait, eau potable, etc. La valeur NPP est exprimée pour 100 ml de volume. MPN repose sur une méthode statistique basée sur la théorie des probabilités. Il existe des tableaux statistiques conçus pour trouver les valeurs NPP pour 100 ml d'échantillon. Ces tableaux montrent les résultats avec des limites de confiance de 95 %.
La valeur NPP est calculée après avoir exécuté une technique appelée méthode de fermentation en tubes multiples. Trois ensembles de tubes contenant un milieu de culture approprié sont inoculés avec trois volumes différents de l'échantillon tels que 10 ml, 1 ml et 0.1 ml et incubé pour la croissance. Après la période d'incubation, les tubes sont notés + (positif) ou - (négatif) pour la présence ou l'absence de croissance. Le schéma des résultats positifs et négatifs est ensuite comparé à un tableau MPN de probabilités statistiques pour estimer le nombre de micro-organismes. Ensuite, la valeur MPN est donnée pour 100 ml d'échantillon. Le MPN est largement utilisé pour détecter les bactéries coliformes présentes dans les échantillons d'eau.
Figure 02: Tableau MPN
Quelle est la différence entre CFU et MPN ?
CFU contre MPN |
|
| CFU est une mesure utilisée pour exprimer le nombre de colonies bactériennes ou fongiques viables dans un échantillon donné. | MPN est une mesure alternative à CFU et mesure le nombre de cellules bactériennes viables dans un échantillon liquide. |
| Unité | |
| UFC/ml ou UFC/g | MPN/100 ml |
| Calcul | |
| CFU est calculé en comptant le nombre de colonies cultivées sur des plaques de gélose. | MPN est calculé en comparant les schémas positifs et négatifs des tubes avec le tableau statistique MPN. |
| Technique de dilution en série | |
| Une dilution en série est effectuée avant de placer les échantillons sur des plaques de gélose. | La dilution en série n'est normalement pas effectuée lorsque le NPP est calculé |
| Méthodes | |
| La méthode de la plaque étalée et la méthode de la plaque de coulée sont deux types de méthodes utilisées pour obtenir des UFC. | La fermentation en tubes multiples est la méthode utilisée pour obtenir la valeur NPP. |
Résumé – UFC vs MPN
Mesurer la croissance microbienne est nécessaire pour de nombreuses raisons. Dans les usines de transformation des aliments, il est nécessaire de mesurer le niveau et le type de micro-organismes dans les aliments. Dans l'industrie alimentaire et la médecine, il est nécessaire de s'assurer que les traitements de stérilisation sont effectivement appliqués. Dans les usines de traitement des eaux usées, il est nécessaire de procéder régulièrement à un comptage microbien. Lors de l'optimisation de la procédure en biologie moléculaire, il est nécessaire de mesurer le nombre de colonies sur les plaques. Par conséquent, différentes méthodes de dénombrement et de mesure de la croissance sont disponibles. CFU et MPN sont deux de ces méthodes largement adoptées dans divers domaines. L'UFC est une mesure du nombre de colonies bactériennes et fongiques viables présentes dans un échantillon donné. Il est calculé à l'aide de la méthode de comptage sur plaque standard ou de la méthode de comptage sur plaque viable. Le MPN est une autre mesure qui exprime le nombre de cellules bactériennes présentes dans un volume donné de l'échantillon liquide. Il est calculé à l'aide de la méthode de fermentation en tubes multiples et du tableau MPN. C'est la différence entre CFU et MPN.
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