Différence clé - transfection transitoire vs stable
La transfection est un processus impliqué dans le transfert de gènes de cellules eucaryotes à l'aide de méthodes chimiques ou physiques. La transfection peut être classée en deux types principaux nommés transfection transitoire et transfection stable. Au cours de la transfection transitoire, le gène d'intérêt ne parvient pas à s'intégrer au génome de l'hôte et est exprimé temporairement dans l'hôte pendant une courte période alors que, dans une transfection stable, le gène d'intérêt s'intègre au génome de l'hôte et est maintenu à long terme sur plusieurs générations.. C'est la principale différence entre la transfection transitoire et stable. Dans les deux cas, la transfection est réussie et les gènes sont exprimés.
Qu'est-ce que la transfection transitoire ?
La transfection est un outil important pour l'insertion de gènes dans les cellules eucaryotes. Parmi les deux types de transfection, la transfection transitoire est un moyen courant de transfert de gènes. Grâce à un vecteur, des gènes étrangers sont transformés à l'intérieur des cellules hôtes. Une fois que l'ADN étranger pénètre dans la cellule hôte, il a deux options. Il peut soit s'intégrer au génome de l'hôte et se répliquer, soit rester à l'intérieur sans s'intégrer au génome. La transfection transitoire présente l'expression temporaire des gènes insérés sans s'intégrer dans le génome de l'hôte. Les gènes expriment et produisent la protéine codée jusqu'à ce que la cellule se divise. Cependant, en raison de l'incapacité d'intégration, il ne peut pas se répliquer et entrer dans les générations futures. Ce type de transfection réussit pendant une courte période. Au cours de la division cellulaire ou en raison d'autres facteurs, l'ADN étranger est soumis à une dégradation. La transfection transitoire se manifeste lorsque l'ADN étranger se présente sous la forme d'ADN fortement enroulé.
Figure 01: Transfection transitoire
Qu'est-ce qu'une transfection stable ?
Une transfection stable montre une intégration réussie d'un gène étranger dans le génome de l'hôte. Une fois que l'ADN étranger pénètre à l'intérieur de la cellule hôte, une partie de l'ADN étranger s'intègre au génome de l'hôte et en fait partie. Par conséquent, l'ADN étranger se réplique également et passe dans les générations futures lorsque le génome de l'hôte se réplique. Ce type de transfection est complexe et rare. Cependant, en raison de la transfection stable dans le génome, ce trait est maintenu pendant une période plus longue de plusieurs générations.
La transfection stable est un processus difficile et nécessite une livraison efficace de l'ADN et l'acquisition cellulaire de l'ADN étranger dans son génome. Par conséquent, l'ADN linéaire favorise la transfection stable par rapport à l'ADN circulaire. Cependant, le taux de transfection stable est d'environ un sur 104 cellules transformées. Une transfection stable peut être observée par la cotransformation d'un marqueur sélectionnable et la réalisation de la sélection artificielle sur un milieu.
Figure 02: Transfection stable
Quelle est la différence entre transfection transitoire et stable ?
Transfection transitoire vs stable |
|
L'ADN étranger ne s'intègre pas dans le génome de l'hôte. | L'ADN étranger s'intègre au génome de l'hôte et en fait partie. |
Réplication au sein de l'hôte | |
Les gènes transfectés de manière transitoire ne se répliquent pas dans l'hôte. Par conséquent, les gènes ne sont pas transmis aux générations suivantes. | Les gènes sont répliqués dans l'hôte et transmis aux générations futures. |
Durée de l'expression génique | |
Les gènes sont exprimés pendant une période de temps finie et après cela, ils sont détruits. | Les gènes font partie du génome et s'expriment au sein de la génération pendant une longue période. |
Utiliser | |
Ceci est utile pour étudier les effets de l'expression à court terme de gènes ou de produits géniques. | Ceci est utile pour étudier les effets des expressions géniques à long terme. |
Détection de la transfection | |
Les gènes sont exprimés et peuvent être facilement détectés en insérant un gène rapporteur. | Une transfection stable peut être facilement détectée en insérant un marqueur sélectionnable et en sélectionnant par sélection artificielle sur support. |
Occurrence et processus | |
La transfection transitoire est courante et simple à réaliser. | La transfection stable est rare et complexe à réaliser. |
Nature de l'ADN | |
L'ADN hautement superenroulé convient à la transfection transitoire. | L'ADN linéaire convient à une transfection stable. |
Applications | |
Ceci est utilisé pour les études de knockdown ou de silençage génique avec des ARN inhibiteurs, la production de protéines à petite échelle | Ceci est utilisé pour la production de protéines à grande échelle, des études pharmacologiques à long terme, la thérapie génique, la recherche sur les mécanismes de régulation génétique à long terme |
Résumé – Transfection transitoire vs stable
Les transfections transitoires et stables sont deux types de transfections montrées lors du transfert de gène dans des cellules eucaryotes par des systèmes non viraux. L'ADN étranger transformé n'est pas intégré au génome de l'hôte dans la transfection transitoire alors qu'il s'intègre au génome de l'hôte dans la transfection stable. L'ADN circulaire enroulé présente une transfection transitoire alors que l'ADN linéaire préfère une transfection stable. C'est la différence entre transfection transitoire et stable. Cependant, la transfection transitoire est plus courante et plus facile que la transfection stable. Mais la sélection d'un parmi deux dépend de l'objectif du transfert de gènes et de la durée du projet de recherche.