La principale différence entre la HPLC en phase inverse et en phase normale est que la HPLC en phase inverse utilise une phase stationnaire non polaire et une phase mobile polaire, tandis que la HPLC en phase normale utilise une phase stationnaire polaire et une phase mobile moins polaire.
La HPLC en phase normale est la plus ancienne technique de HPLC utilisée par Tswett dans ses séparations d'extraits de plantes; il a utilisé de la craie dans une colonne de verre. C'est le mode classique de chromatographie qui a conduit à le nommer technique « normale ». L'HPLC en phase inversée, en revanche, est à l'opposé de la technique normale, que les scientifiques ont développée récemment.
Qu'est-ce que la CLHP en phase inverse ?
HPLC en phase inverse est une technique chromatographique dans laquelle nous utilisons une phase stationnaire hydrophobe. Parmi toutes les méthodes HPLC, nous utilisons cette méthode pour environ 70 % en raison de sa large applicabilité et de sa reproductibilité. La phase stationnaire est non polaire et la phase mobile est polaire.
La plupart du temps, les scientifiques utilisent un mélange aqueux d'eau avec un solvant organique polaire miscible, tel que l'acétonitrile ou le méthanol comme phase mobile. Par conséquent, les analytes interagissent avec la phase stationnaire non polaire.
Qu'est-ce que la CLHP en phase normale ?
La HPLC en phase normale est une technique chromatographique dans laquelle nous utilisons une phase stationnaire hydrophile. C'est la méthode traditionnelle de HPLC, même si nous ne l'utilisons pas beaucoup. La phase stationnaire est polaire et la phase mobile est non polaire. Plus important encore, la phase mobile de cette technique est 100% organique. Cela signifie qu'aucune eau n'est utilisée pour cela.
Figure 01: Un profil d'échantillon pour les chromatogrammes HPLC en phase normale et en phase inverse en fonction de la polarité des composants de l'analyte.
Typiquement, la phase stationnaire contient de la silice, du cyano, du diol, des phases à liaison amino, etc. Les phases mobiles comprennent des solvants organiques tels que l'hexane, l'acétate d'éthyle, etc. Cette technique repose sur la rétention des molécules de solvant ou d'analyte sur la phase stationnaire polaire.
Quelle est la différence entre HPLC en phase inverse et en phase normale ?
HPLC en phase inverse est une technique chromatographique dans laquelle nous utilisons une phase stationnaire hydrophobe. La phase stationnaire de cette technique est non polaire tandis que la phase mobile est polaire. De plus, les scientifiques utilisent un mélange aqueux d'eau avec un solvant organique polaire miscible, tel que l'acétonitrile ou le méthanol comme phase mobile dans la HPLC en phase inverse. En revanche, la HPLC en phase normale est une technique chromatographique dans laquelle on utilise une phase stationnaire hydrophile. La phase stationnaire de cette technique est polaire tandis que la phase mobile est non polaire. En plus de cela, les scientifiques utilisent des solvants organiques tels que l'hexane, l'acétate d'éthyle, etc. comme phase mobile de la HPLC en phase normale. L'infographie ci-dessous présente la différence entre HPLC en phase inverse et en phase normale sous forme de tableau.
Résumé - HPLC en phase inverse vs en phase normale
Les techniques HPLC en phase inverse et en phase normale sont deux techniques de chromatographie liquide. le différence clé entre HPLC en phase inverse et en phase normale est que la HPLC en phase inverse utilise une phase stationnaire non polaire et une phase mobile polaire tandis que la HPLC en phase normale utilise une phase stationnaire polaire et une phase mobile moins polaire.
