La principale différence entre la chromatographie d'échange d'ions et la chromatographie d'exclusion stérique est que la chromatographie d'échange d'ions est utilisée pour analyser les substances ioniques en fonction de la charge, tandis que la chromatographie d'exclusion stérique est utilisée pour analyser les grosses molécules en fonction de la taille.
La chromatographie est une technique analytique qui peut être utilisée pour analyser différents mélanges. Les techniques chromatographiques sont nommées en fonction du paramètre utilisé pour analyser les substances – par ex. chromatographie d'exclusion stérique, chromatographie d'échange d'ions, etc.
Qu'est-ce que la chromatographie par échange d'ions ?
La chromatographie échangeuse d'ions est une technique analytique dans laquelle nous pouvons analyser des substances ioniques. Il est souvent utile d'analyser les anions et cations inorganiques (c'est-à-dire les anions chlorure et nitrate et les cations potassium, sodium). Bien que ce ne soit pas une méthode très courante, nous pouvons analyser les ions organiques en l'utilisant. De plus, nous pouvons utiliser cette technique pour la purification des protéines car les protéines sont des molécules chargées à certaines valeurs de pH. Ici, nous utilisons une phase stationnaire solide à laquelle les particules chargées peuvent se fixer. Par exemple, on peut utiliser les copolymères de résine polystyrène-divinylbenzène comme support solide.
Figure 01: Théorie de la chromatographie par échange d'ions
Pour expliquer cela plus en détail, la phase stationnaire contient des ions fixes tels que des anions sulfate ou des cations amine quaternaire. Chacun d'eux doit être associé à un contre-ion (un ion de charge opposée) si l'on veut maintenir la neutralité de ce système. Si le contre-ion est un cation, nous appelons le système une résine échangeuse de cations. Mais, si le contre-ion est un anion, le système est une résine échangeuse d'anions. De plus, la chromatographie par échange d'ions comporte cinq étapes principales:
- Étape initiale
- Adsorption de la cible
- Démarrage de l'élution
- Fin d'élution
- Régénération
Qu'est-ce que la chromatographie d'exclusion de taille ?
La chromatographie d'exclusion stérique ou SEC est une technique analytique dans laquelle les molécules d'un mélange peuvent être séparées par leur taille et leur poids moléculaire. Habituellement, cela fonctionne avec de grosses molécules appelées macromolécules. Typiquement, une solution aqueuse est utilisée pour l'analyse. On parle alors de chromatographie par filtration sur gel. Lorsqu'il s'agit d'un solvant organique, on l'appelle chromatographie par perméation de gel.
La chromatographie par filtration sur gel est une forme de chromatographie d'exclusion stérique dans laquelle nous utilisons une solution aqueuse comme phase mobile. Par conséquent, la phase mobile que nous utilisons souvent dans cette technique est un tampon aqueux. De plus, nous utilisons une colonne chromatographique pour cette séparation et nous devons garnir la colonne de billes poreuses. Habituellement, le Sephadex et l'agarose sont utiles comme matériau poreux. Par conséquent, ces matériaux sont la phase stationnaire de notre expérience. De plus, nous pouvons utiliser la taille des pores de ces billes pour déterminer la taille des macromolécules que nous séparons. Cependant, ce n'est qu'une estimation.
Figure 02: Un appareil pour la chromatographie d'exclusion de taille
La chromatographie par perméation de gel est une forme de chromatographie d'exclusion stérique dans laquelle nous utilisons un solvant organique comme phase mobile. Par conséquent, nous pouvons utiliser des solutions telles que l'hexane et le toluène à cette fin. La phase stationnaire est un matériau poreux, le même que dans la chromatographie de filtration sur gel. Cette technique est souvent appliquée aux polymères et autres matières organiques solubles. Le mode d'action de la technique est similaire à celui de la chromatographie par filtration sur gel.
Quelle est la différence entre l'échange d'ions et la chromatographie d'exclusion stérique ?
La chromatographie est une technique analytique qui peut être utilisée pour analyser différents mélanges. le différence clé entre la chromatographie d'échange d'ions et la chromatographie d'exclusion de taille est que la chromatographie d'échange d'ions est utilisée pour analyser les substances ioniques en fonction de la charge, tandis que la chromatographie d'exclusion de taille est utilisée pour analyser les grosses molécules en fonction de la taille.
L'infographie ci-dessous donne plus d'informations sur la différence entre l'échange d'ions et la chromatographie d'exclusion stérique.
Résumé - Échange d'ions vs chromatographie d'exclusion de taille
La chromatographie est une technique analytique qui peut être utilisée pour analyser différents mélanges. le différence clé entre la chromatographie d'échange d'ions et la chromatographie d'exclusion de taille est que la chromatographie d'échange d'ions est utilisée pour analyser les substances ioniques en fonction de la charge, tandis que la chromatographie d'exclusion de taille est utilisée pour analyser les grosses molécules en fonction de la taille.
