La principale différence entre la GFP et l'EGFP est que la GFP est une protéine de type sauvage incorporée dans le clonage moléculaire de cellules non mammifères, tandis que l'EGFP est un type amélioré ou modifié de GFP qui peut être utilisé sur des cellules de mammifères..
Le clonage moléculaire est une technique avancée que les scientifiques utilisent énormément pour exprimer des protéines via la technologie recombinante. Dans la technologie de l'ADN recombinant, il est nécessaire de transformer avec succès le vecteur recombinant en organisme hôte. Par conséquent, au cours du processus de transformation, il convient d'identifier et de confirmer si le gène d'intérêt a été transformé ou non chez l'hôte. Pour évaluer cela, les biologistes moléculaires adoptent plusieurs techniques. Parmi ces techniques, l'une est le gène rapporteur. Ces gènes rapporteurs agissent comme des marqueurs sélectionnables pour sélectionner les transformants corrects. Ainsi, la protéine fluorescente verte (GFP) et la protéine fluorescente verte améliorée (EGFP) sont deux protéines rapporteuses utilisées dans le clonage moléculaire.
Qu'est-ce que GFP ?
GFP est une protéine de type sauvage qui contient 238 résidus d'acides aminés et plusieurs régions sélectionnables de séquences d'acides aminés qui la distinguent des autres protéines fluorescentes. De plus, cette protéine de type sauvage était à l'origine isolée d'Aequorea Victoria; une sorte de méduse. Cependant, lors de phénomènes naturels, la méduse était capable de produire une fluorescence de couleur verte en réponse à certains stimuli.
Plus tôt, ce concept a surpris les scientifiques, et ils ont décidé de l'utiliser sur leurs technologies d'ADN recombinant. Par conséquent, les scientifiques ont utilisé cette forme mutante du gène de type sauvage comme gène rapporteur dans leurs études d'expression génique. Le gène sauvage de la GFP est capable de produire une protéine fluorescente à température ambiante ou sous lumière UV. Par conséquent, lorsqu'il est inséré dans les transformants, il exprime et produit une fluorescence. Si la fluorescence résulte après le processus de transformation, cela confirme le succès du processus de transformation. En termes simples, l'émission de fluorescence signale la transformation réussie du vecteur qui transporte le gène d'intérêt dans l'hôte.
Figure 01: GFP
Pour cette raison, la GFP agit comme un marqueur in vivo de l'expression génique. À l'heure actuelle, des techniques de génie génétique sont utilisées pour produire la GFP. En outre, de nombreuses versions améliorées de GFP telles que EGFP sont disponibles. Par conséquent, cela permet une utilisation efficace de la GFP dans les études de clonage moléculaire et d'expression génique.
Qu'est-ce que l'EGFP ?
Enhanced Green Fluorescent Protein ou EGFP est une version améliorée de la GFP. En termes simples, nous pouvons définir l'EGFP comme une version technique de la GFP de type sauvage. Lorsque le gène de type sauvage de la GFP mute, il produit des effets bénéfiques. Par conséquent, le gène muté de la GFP permet l'expression de nouveaux caractères et, par conséquent, nous pouvons produire une GFP améliorée avec des caractéristiques améliorées. De plus, nous pouvons introduire avec succès des mutations dans le gène GFP de type sauvage en utilisant des méthodes d'irradiation ou chimiques. Ces gènes mutés produisent alors l'EGFP, qui a des caractéristiques plus bénéfiques.
Figure 02: EGFP
Les caractéristiques améliorées de l'EGFP sont les suivantes;
- Capable d'émettre des signaux de fluorescence plus forts.
- Haute sensibilité.
- Peut être utilisé sur des cellules de mammifères au lieu de procaryotes et d'autres eucaryotes de niveau inférieur.
- Fournit également une pureté accrue du produit.
Par conséquent, par rapport à la GFP, l'EGFP est le choix préféré pour les études d'expression génique. Cependant, le produit est plus cher que GFP.
Quelles sont les similitudes entre GFP et EGFP ?
- GFP et EGFP sont deux protéines qui ont la capacité d'émettre une couleur verte
- Par conséquent, les deux fonctionnent comme des protéines rapporteurs dans les études d'expression génique.
- De plus, il est possible de synthétiser les deux en utilisant la technologie de l'ADN recombinant.
- De plus, il est facile de muter davantage ces deux types pour synthétiser des formes améliorées.
Quelle est la différence entre GFP et EGFP ?
Le gène rapporteur est un gène qui s'attache au gène d'intérêt dans la technologie de l'ADN recombinant. Il signale la transformation réussie du vecteur recombinant vers l'hôte. Ici, GFP et EGFP sont deux types de protéines fluorescentes vertes qui fonctionnent comme des protéines rapporteurs. Cependant, la principale différence entre GFP et EGFP est que le GFP est un type sauvage tandis que l'EGFP est une version technique de GFP. De plus, l'EGFP a des caractéristiques plus bénéfiques que la GFP. Par exemple, l'EGFP produit une lumière fluorescente plus forte et est plus sensible que le GFP. Une autre différence entre GFP et EGFP réside dans les systèmes dans lesquels nous pouvons les utiliser. Les systèmes non mammifères utilisent GFP tandis que les systèmes mammifères utilisent EGFP.
L'infographie ci-dessous présente la différence entre GFP et EGFP sous forme de tableau.
Résumé - GFP vs EGFP
GFP et EGFP sont des protéines rapporteurs dans les études de clonage moléculaire et d'expression génique. La GFP est la protéine de type sauvage, qui est une protéine fluorescente verte. La protéine était initialement isolée de la méduse Aequorea victoria. En revanche, l'EFGP est une forme améliorée de la protéine GFP. C'est un mutant du type sauvage avec des caractéristiques améliorées. Par conséquent, EFGP a la force de signal la plus élevée et la sensibilité la plus élevée. Par conséquent, nous pouvons l'utiliser sur des vecteurs mammifères. En revanche, l'utilisation de la GFP est principalement uniquement sur des vecteurs non mammifères. Dans l'ensemble, c'est la différence entre GFP et EGFP.
