Quelle est la différence entre l'immunoprécipitation et la coimmunoprécipitation

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Quelle est la différence entre l'immunoprécipitation et la coimmunoprécipitation
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Anonim

La principale différence entre l'immunoprécipitation et la coimmunoprécipitation est que l'immunoprécipitation est une technique qui précipite une protéine hors de la solution à l'aide d'un anticorps spécifique, tandis que la coimmunoprécipitation est une technique qui précipite des complexes protéiques intacts hors de la solution à l'aide d'un anticorps spécifique.

L'interaction antigène-anticorps est une interaction chimique spécifique entre les anticorps produits par les lymphocytes B et les antigènes (protéines) lors d'une réaction immunitaire. Normalement, les antigènes solubles se combinent avec des anticorps solubles en présence d'un électrolyte à température et pH solubles pour former un complexe visible insoluble. C'est ce qu'on appelle une réaction de précipitation. Par conséquent, l'immunoprécipitation et la co-immunoprécipitation sont deux types de réactions de précipitation couramment utilisées dans les laboratoires pour identifier des protéines telles que des antigènes.

Qu'est-ce que l'immunoprécipitation ?

L'immunoprécipitation est une technique de précipitation d'une protéine à partir d'une solution à l'aide d'un anticorps spécifique. Parfois, cette technique est également connue sous le nom d'immunoprécipitation de protéines individuelles. L'immunoprécipitation utilise un anticorps pour isoler une protéine d'intérêt sélectionnée à partir d'un lysat cellulaire. L'anticorps purifie sa protéine cible spécifique ou son antigène à partir d'un mélange. L'anticorps se lie à la protéine et le complexe anticorps-antigène est extrait de l'échantillon. Dans la configuration expérimentale, le complexe antigène-anticorps est extrait à l'aide d'agarose couplé à la protéine A/G ou de billes magnétiques. Plus tard, les billes sont lavées et la protéine d'intérêt est éluée. La protéine ou l'antigène purifié obtenu par immunoprécipitation est vérifié par une variété de techniques telles que le test immuno-enzymatique (ELISA) et le Western blot (WB).

Immunoprécipitation vs coimmunoprécipitation - Comparaison côte à côte
Immunoprécipitation vs coimmunoprécipitation - Comparaison côte à côte

Figure 01: Immunoprécipitation

De plus, les protéines ou antigènes isolés peuvent être quantifiés et identifiés par spectrométrie de masse en utilisant des schémas de digestion enzymatique basés sur la séquence primaire. Il y a certaines considérations avant de commencer une expérience d'immunoprécipitation: choix du format de la méthode, liaison des protéines et des billes, choix du bon anticorps primaire et isotype, et contrôle négatif.

Qu'est-ce que la co-immunoprécipitation ?

La co-immunoprécipitation est une technique de précipitation de complexes protéiques intacts hors de la solution à l'aide d'un anticorps spécifique. La co-immunoprécipitation fonctionne généralement en sélectionnant un anticorps spécifique qui cible une protéine connue (antigène) dont on pense qu'elle fait partie d'un plus grand complexe de protéines. En ciblant le membre connu avec un anticorps spécifique, il est possible de retirer tout le complexe protéique de la solution. Cela permet l'identification des membres inconnus du complexe. Le concept d'extraction de complexes protéiques hors de la solution est parfois appelé mécanisme "pull-down".

Immunoprécipitation et coimmunoprécipitation - Comparaison côte à côte sous forme tabulaire
Immunoprécipitation et coimmunoprécipitation - Comparaison côte à côte sous forme tabulaire

Figure 02: B Co-immunoprécipitation

La co-immunoprécipitation est une technique puissante utilisée pour analyser les interactions protéine-protéine. L'objectif principal de la co-immunoprécipitation est l'identification de partenaires d'interaction tels que des ligands, des cofacteurs ou des molécules de signalisation de la protéine d'intérêt. De plus, la co-immunoprécipitation est une technique efficace utilisée pour séparer les protéines du sérum, du lysat cellulaire, du tissu homogénéisé ou du milieu conditionné.

Quelles sont les similitudes entre l'immunoprécipitation et la coimmunoprécipitation ?

  • L'immunoprécipitation et la coimmunoprécipitation sont deux types de techniques basées sur la réaction de précipitation.
  • Les deux techniques peuvent être utilisées pour identifier l'antigène cible grâce à un anticorps spécifique.
  • Les deux techniques dépendent fortement de l'interaction antigène-anticorps.
  • Ils sont couramment utilisés dans les laboratoires cliniques.

Quelle est la différence entre l'immunoprécipitation et la co-immunoprécipitation ?

L'immunoprécipitation est une technique qui précipite une protéine hors de la solution à l'aide d'un anticorps spécifique, tandis que la coimmunoprécipitation est une technique qui précipite des complexes protéiques intacts hors de la solution à l'aide d'un anticorps spécifique. C'est donc la principale différence entre l'immunoprécipitation et la coimmunoprécipitation. De plus, l'immunoprécipitation est plus couramment utilisée dans les laboratoires, tandis que la coimmunoprécipitation n'est pas couramment utilisée dans les laboratoires.

L'infographie ci-dessous présente les différences entre l'immunoprécipitation et la coimmunoprécipitation sous forme de tableau pour une comparaison côte à côte.

Résumé – Immunoprécipitation vs Coimmunoprécipitation

L'immunoprécipitation et la coimmunoprécipitation sont deux types de techniques basées sur la réaction de précipitation qui dépendent de l'interaction antigène-anticorps. La technique d'immunoprécipitation précipite une protéine hors de la solution à l'aide d'un anticorps spécifique, tandis que la technique de co-immunoprécipitation précipite des complexes protéiques intacts hors de la solution à l'aide d'un anticorps spécifique. Donc, cela résume la différence entre l'immunoprécipitation et la co-immunoprécipitation.

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