La principale différence entre BL21 et DH5 Alpha est que BL21 est une cellule E. coli compétente génétiquement modifiée déficiente en protéase utilisée principalement pour l'expression des protéines, tandis que DH5 Alpha est une cellule E. coli compétente génétiquement modifiée avec mutation recA1 utilisée principalement pour la transformation plasmidique.
E. coli est l'un des célèbres organismes de choix pour la production de protéines recombinantes. Il est devenu la plateforme d'expression la plus populaire au fil des ans. Il est également utilisé comme usine de cellules. BL21 et DH5 Alpha sont deux cellules E. coli génétiquement modifiées actuellement utilisées pour l'expression des protéines et la transformation des plasmides, respectivement.
Qu'est-ce que BL21 ?
BL21 est une cellule E. coli compétente génétiquement modifiée et déficiente en protéase principalement utilisée pour l'expression des protéines. E. coli BL21 est une cellule bactérienne dérivée de la souche B. Il présente des défauts de la protéase Lon et de la protéase de la membrane externe ompT. Il est couramment utilisé pour l'expression de protéines recombinantes car il apporte normalement une stabilité aux protéines exprimées. BL21 est utile pour l'expression de protéines avec l'ADN pCold I-IV et l'ADN pCold TF. Mais cette cellule E. coli compétente n'est pas destinée à un système d'expression protéique utilisant le promoteur T7 tel que le système pET. La raison derrière cela est que BL21 n'exprime pas l'ARN polymérase T7. De plus, il n'est pas recommandé de l'utiliser pour la construction ou la préparation du plasmide car il ne possède pas de mutation recA.
Figure 01: BL21
BL21 a été décrit pour la première fois par Studier en 1986 après diverses modifications de la lignée B. Les cellules BL21 sont déficientes en protéase LON, qui dégrade de nombreuses protéines étrangères. De plus, il manque un autre gène qui code pour la protéase de la membrane externe (OmpT) dont la fonction est de dégrader les protéines extracellulaires. Un manque de ces protéines déclenche la production réussie de protéines étrangères dans les cellules E. coli BL21. De plus, la mutation hsdSB dans ces cellules empêche la méthylation et la perturbation de l'ADN étranger dans les cellules BL21.
Qu'est-ce que DH5 Alpha ?
DH5 Alpha est une cellule E. coli compétente génétiquement modifiée avec la mutation recA1 qui est principalement utilisée pour la transformation plasmidique. Les cellules DH5 Alpha E. coli sont génétiquement modifiées par le biologiste américain Douglas Hanahan pour maximiser l'efficacité de la transformation. La cellule DH5 Alpha a trois mutations distinctes: recA1, endA1 et lacZΔM15. recA1 est une mutation ponctuelle qui remplace la glycine 160 par un résidu d'acide aspartique dans le polypeptide recA. Cette mutation désactive l'activité des recombinases et inactive la recombinaison homologue. La mutation endA1 inactive une endonucléase intracellulaire qui l'empêche de dégrader le plasmide inséré.
Figure 02: DH5 Alpha
De plus, la mutation lacZΔM15 permet le criblage bleu-blanc des cellules transformées. Ces cellules sont des cellules compétentes. Ils sont souvent utilisés avec une transformation au chlorure de calcium pour insérer le plasmide souhaité. Il a été identifié par des recherches récentes que la cellule DH5 Alpha avec la méthode Hanahan était la cellule compétente la plus efficace pour la transformation plasmidique.
Quelles sont les similitudes entre BL21 et DH5 Alpha ?
- BL21 et DH5 Alpha sont deux E.coli génétiquement modifiés
- Les deux sont des cellules compétentes.
- Ils consistent en des mutations distinctes.
- Les deux n'ont pas d'habitat naturel.
- Ceux-ci sont utilisés à des fins de laboratoire telles que les études d'expression et les procédures de clonage.
Quelle est la différence entre BL21 et DH5 Alpha ?
BL21 est une cellule E. coli compétente génétiquement modifiée déficiente en protéase principalement utilisée pour l'expression des protéines. D'autre part, DH5 Alpha est une cellule E. coli compétente génétiquement modifiée avec la mutation recA1 principalement utilisée pour la transformation plasmidique. C'est donc la principale différence entre BL21 et DH5 Alpha. De plus, la cellule BL21 E. coli n'a pas de mutation recA1, tandis que la cellule DH5 Alpha E. coli a la mutation recA1.
L'infographie suivante répertorie les différences entre BL21 et DH5 Alpha sous forme de tableau.
Résumé – BL21 contre DH5 Alpha
Les souches non pathogènes d'E. coli sont génétiquement développées par des scientifiques pour des études d'expression en laboratoire et à des fins de clonage. BL21 et DH5 Alpha sont deux cellules E. coli génétiquement modifiées. BL21 est principalement utilisé pour les études d'expression des protéines. D'autre part, DH5 Alpha est principalement utilisé à des fins de transformation plasmidique. Voici donc le résumé de la différence entre BL21 et DH5 Alpha.
