Différence clé - HPLC vs HPTLC
La principale différence entre la HPLC et la HPTLC est que la HPLC permet la séparation quantitative des composants d'un échantillon, tandis que la HPTLC ne permet pas la séparation quantitative des composants d'un échantillon.
La chromatographie est une méthode de séparation physique utilisée pour séparer et identifier les composants d'un mélange. HPLC et HPTLC sont des techniques chromatographiques. HPLC est une chromatographie liquide à haute performance. HPTLC est une chromatographie sur couche mince à haute performance.
Qu'est-ce que la CLHP ?
HPLC est une chromatographie liquide à haute performance. Il s'agit d'une technique analytique utilisée pour séparer, identifier et quantifier les composants d'un mélange. Dans cette technique, l'échantillon est dissous dans un solvant approprié. Ensuite, le solvant avec l'échantillon est passé à travers une pompe avec une pression donnée. La pompe est remplie de matériau adsorbant solide. Ensuite, certains composants se lient fortement au matériau absorbant tandis que d'autres composants se lient de manière lâche. Cela amène les composants à avoir des débits différents à travers la pompe. Par conséquent, les composants peuvent être facilement séparés.
Figure 01: Un système HPLC
Le matériau adsorbant qui remplit la pompe est appelé phase stationnaire. Le solvant avec l'échantillon dissous est appelé phase mobile. La pompe utilisée dans cette technique s'appelle la colonne. La colonne est remplie d'un matériau adsorbant, le plus souvent des particules de silice. La taille de ces particules peut aller de 2 à 50 μm. Le processus de séparation est affecté par la composition de la phase mobile et la température du système. Les interactions entre la phase stationnaire et le composant de l'échantillon peuvent être des interactions hydrophobes, des interactions dipôle-dipôle, des liaisons ioniques, etc.
La pression de fonctionnement de la HPLC est considérablement plus élevée que celle de la chromatographie liquide traditionnelle. Il se situe autour de 50-350 bars. La différence entre la chromatographie liquide et la HPLC est qu'en chromatographie liquide, l'échantillon tombe à travers la colonne par gravité alors qu'en HPLC, l'échantillon est pressurisé à travers la colonne. La taille de la colonne et les particules absorbantes sont également très petites par rapport à la chromatographie liquide traditionnelle. Cependant, la résolution donnée par la technique HPLC est supérieure.
Qu'est-ce que la HPTLC ?
HPTLC est une chromatographie sur couche mince à haute performance. C'est la forme avancée et automatisée de la TLC traditionnelle. Cette technique fournit une résolution efficace à une courte période de temps. Dans cette méthode d'analyse, l'échantillon et une référence peuvent être analysés en même temps, ce qui permet de comparer l'échantillon à la référence. Il donne une précision analytique améliorée par rapport aux autres techniques chromatographiques. Le temps d'analyse est moindre. La technique est une technique peu coûteuse.
Figure 02: Une analyse des colorants alimentaires à l'aide de HPTLC
La méthode HPTLC est un processus simple, et l'étape de préparation de l'échantillon est également éliminée (dans la CCM traditionnelle, l'étape de préparation de l'échantillon est incluse avant la séparation. Cette étape implique le nettoyage et l'enrichissement). Le solvant peut être utilisé directement sans prétraitement bien que d'autres techniques chromatographiques nécessitent des prétraitements tels que dégazage, filtration, etc.
Le matériau adsorbant utilisé en HPTLC est la silice avec de très petites tailles de particules. En CCM traditionnelle, la taille des particules de silice est de 5 à 20 μm alors qu'en HPTLC, elle est de 4 à 8 μm. L'échantillon est appliqué sur la plaque HPTLC à l'aide d'un applicateur. Il donne une application uniforme et sûre. Ensuite, les plaques sont placées dans une chambre contenant la phase mobile. La chambre doit être saturée avec la vapeur de la phase mobile. Après le processus HPTLC, les taches qui se sont déplacées peuvent être détectées. Lors de la détection des taches sur la plaque, la technique HPTLC utilise une région UV appropriée ou une chambre à iode.
Quelle est la différence entre HPLC et HPTLC ?
HPLC contre HPTLC |
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| HPLC est une chromatographie liquide haute performance. | HPTLC est une chromatographie sur couche mince à haute performance. |
| Technique | |
| En HPLC, la phase mobile avec le solvant passe à travers une colonne remplie de phase stationnaire. | En HPTLC, l'échantillon est déposé sur une plaque TLC et est placé à l'intérieur d'une chambre contenant la phase mobile; puis l'échantillon est autorisé à migrer vers le haut de la plaque avec la phase mobile. |
| Mesure | |
| En HPLC, les différences entre les débits des composants à travers la colonne sont utilisées pour séparer les composants de l'échantillon. | En HPTLC, les différences entre les distances parcourues par chaque composant de l'échantillon sont utilisées pour séparer les composants de l'échantillon. |
| Séparation quantitative | |
| HPLC permet la séparation quantitative des composants d'un échantillon. | L'HPTLC ne permet pas la séparation quantitative des composants d'un échantillon. |
Résumé - HPLC vs HPTLC
HPLC et HPTLC sont deux techniques chromatographiques. le différence clé entre HPLC et HPTLC est que HPLC permet la séparation quantitative des composants dans un échantillon alors que HPTLC ne permet pas la séparation quantitative des composants dans un échantillon.
