Différence clé - YAC vs M13 Phage Vector
Le clonage d'ADN est un processus important qui permet la propagation d'importants fragments d'ADN d'organismes. Cela nécessite la jonction d'un ADN spécifique avec un ADN vecteur pour créer un ADN recombinant qui se transforme dans l'organisme hôte. Un vecteur est une molécule d'ADN qui se comporte comme un véhicule pour transporter du matériel génétique étranger dans une autre cellule ou un autre organisme. Il doit être capable de se répliquer à l'intérieur de l'organisme hôte et de produire de multiples copies d'ADN recombinant. Il existe différents types de vecteurs utilisés dans le clonage d'ADN. Le chromosome artificiel de levure (YAC) et le vecteur de phage M13 en sont deux types.le différence clé entre YAC et le vecteur de phage M13 est que YAC est un chromosome artificiel qui se réplique dans les cellules de levure tandis que le vecteur de phage M13 est un ADN circulaire simple brin du bactériophage M13 qui se réplique dans les cellules E Coli.
Qu'est-ce qu'un vecteur YAC ?
YAC est un chromosome construit artificiellement qui a la capacité de transporter un grand segment d'ADN étranger et de se répliquer dans les cellules de levure. Il possède des séquences de centromère, de télomère et de réplication autonome essentielles à la réplication et à la stabilité. Le YAC devrait également porter un marqueur sélectif ou des marqueurs et des sites de restriction pour en faire un vecteur de clonage efficace. De grandes séquences allant de 1 000 kb à 2 000 kb peuvent être insérées dans le YAC et transférées dans la levure.
Figure 01: Vecteur YAC
Qu'est-ce que le vecteur phage M13 ?
Bacteriophage M13 est un virus qui infecte et se réplique dans E Coli. Le génome du bactériophage M13 est de petite taille, environ 6,7 kb. C'est un ADN monocaténaire, circulaire et sens positif. Ce virus infecte spécifiquement la bactérie E Coli par F pilus. Une fois qu'il entre dans l'ADNss dans la bactérie, il synthétise son brin complémentaire et devient l'ADNds ou la forme réplicative (RF) de M13. RF peut se comporter comme un plasmide dans l'organisme hôte. Le dsDNA se réplique dans E Coli et produit du ssDNA portant de nouveaux phages. Ces nouveaux phages sont continuellement libérés de l'E Coli sans tuer la cellule hôte. Cependant, l'infection ralentit la croissance d'E Coli. L'ADNdb peut être extrait de cellules bactériennes et utilisé comme vecteur dans le clonage d'ADN. Ils sont connus sous le nom de vecteurs de phage M13. Ils peuvent être facilement manipulés et utilisés de la même manière que les vecteurs plasmidiques.
La capacité inhérente d'infection de ces phages M13 constitue une bonne qualification pour être utilisé comme vecteur dans le clonage de gènes. Lors du développement de M13 en vecteur, plusieurs éléments doivent être incorporés dans son génome. Il s'agit d'un gène pour la protéine répresseur lac (lac I), de la région proximale de l'opérateur du gène lac Z, d'un promoteur lac et d'un site de clonage multiple (polylinker). Lorsque l'ADNdb du M13 est utilisé comme vecteurs, il peut être traité comme un vecteur plasmidique. Cependant, l'utilisation de ssDNA M13 présente des avantages dans le séquençage de l'ADN et la mutagenèse dirigée.
Étant donné que le vecteur de phage M13 porte plusieurs sites de clonage dans la région lacZ, les vecteurs recombinés peuvent être facilement identifiés par le criblage de colonies bleues/blanches sur des plaques de gélose contenant de l'IPTG et du X-Gal. Les plaques bleues produites sur les plaques ne contiennent pas les phages recombinés. Par conséquent, les phages avec des inserts peuvent être sélectionnés à des fins de clonage.
Figure 02: Bactériophage M13
Quelle est la différence entre YAC et M13 Phage Vector ?
YAC vs M13 Phage Vector |
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| YAC est un chromosome génétiquement modifié qui a la capacité de transporter un grand segment d'ADN étranger et de se répliquer dans les cellules de levure. | M13 phage vector est un vecteur viral développé par le bactériophage M13 qui est utilisé pour insérer de l'ADN étranger dans E Coli. |
| Objectif | |
| Les YAC ont été conçus pour cloner de grands fragments d'ADN génomique dans la levure. | Les vecteurs de phage M13 sont utilisés pour insérer de l'ADN étranger dans E Coli. |
| Insérer la longueur | |
| Les YAC peuvent contenir des inserts génomiques de la taille d'une mégabase (1 000 kb à 2 000 kb). | La taille des inserts est d'environ 1 500 bps. |
| Construction | |
| L'ADN YAC est difficile à purifier intact et nécessite une concentration élevée pour générer le système de vecteur YAC. | Il se produit via une chaîne d'électrons photosynthétique cyclique. |
| Stabilité | |
| YAC est instable. | Les phages M13 peuvent être facilement extraits. |
| Taille | |
| Les enzymes sont des molécules plus grosses. | Les phages M13 sont plus stables que YAC. |
Résumé – YAC vs M13 Phage Vector
YAC est un système de vecteur construit artificiellement utilisant une région spécifique du chromosome de la levure pour insérer de grands segments de matériel génétique dans les cellules de levure. Le vecteur de phage M13 est un système de vecteur dérivé du bactériophage M 13 qui utilise E coli comme organisme hôte. C'est la principale différence entre YAC et M13 Phage Vector. Les deux sont également utiles dans la technologie de l'ADN recombinant et le clonage de gènes.
