Différence clé - Nitrocellulose vs Nylon Membrane
Le transfert est une technique importante pour la détection de séquences spécifiques d'ADN, d'ARN et de protéines à partir de leurs mélanges en biologie moléculaire. Cela se fait à l'aide d'une membrane appelée blot. Il existe différentes techniques de transfert telles que le transfert du nord, du sud et de l'ouest. La sélection d'une membrane appropriée pour le processus de transfert doit être effectuée avec soin pour éviter la liaison non spécifique et les mauvaises détections. La nitrocellulose, le nylon et le PVDF sont des membranes couramment utilisées dans les techniques de transfert. Ils ont des caractéristiques différentes. le différence clé entre la nitrocellulose et la membrane en nylon est que les membranes de nitrocellulose ont un potentiel d'immobilisation des protéines élevé tandis que les membranes en nylon ont un potentiel d'immobilisation des acides nucléiques élevé. Cependant, les deux types de membranes sont fréquemment utilisés dans les techniques de buvardage.
Qu'est-ce qu'une membrane de nitrocellulose ?
La membrane de nitrocellulose est un filtre à membrane couramment utilisé dans les techniques de transfert d'acides nucléiques et de protéines. Il a un fort potentiel de liaison aux protéines. Par conséquent, les membranes de nitrocellulose sont largement utilisées dans la technique de transfert Western. Les membranes de nitrocellulose sont compatibles avec toutes les techniques d'hybridation et présentent des capacités de liaison supérieures sans interférences. Les membranes de nitrocellulose sont naturellement de nature hydrophile. Ils réalisent une interaction hydrophile avec les molécules et les immobilisent efficacement sur la membrane. Les membranes commerciales en nitrocellulose sont disponibles en deux tailles de pores: 0,45 et 0,2 µm.
Figure 01: Membrane de nitrocellulose utilisée en Western Blot
Qu'est-ce qu'une membrane en nylon ?
La membrane en nylon est un autre type de membrane commerciale utilisée dans les techniques de buvardage. Il est alternativement utilisé avec des membranes de nitrocellulose pour le Southern et le Northern Blot. Les membranes en nylon sont idéales pour le Southern blot que la nitrocellulose en raison de leur grande affinité pour la liaison avec l'ADN. En raison de plusieurs caractéristiques uniques des membranes en nylon, les chercheurs utilisent couramment des membranes en nylon pour le buvardage Southern et Northern au lieu d'une membrane de nitrocellulose. Les membranes en nylon sont également recommandées pour le décapage et le resondage, contrairement à la nitrocellulose.
Figure 02: Membrane en nylon utilisée pour le Southern Blot
Quelle est la différence entre la nitrocellulose et la membrane en nylon ?
Nitrocellulose vs Membrane Nylon |
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| Les membranes de nitrocellulose sont cassantes. | Les membranes en nylon sont moins cassantes. |
| Manipulation | |
| Ils sont difficiles à manipuler. | Ils sont faciles à manipuler. |
| Retest | |
| Les membranes de nitrocellulose non supportées sont difficiles à réévaluer. | Le sondage est facile avec les membranes en nylon. |
| Compatibilité avec diverses conditions de stockage | |
| Les membranes de nitrocellulose ont moins de résistance pour résister à diverses conditions de stockage. | Les membranes en nylon réagissent plus efficacement aux diverses conditions de stockage. |
| Utiliser | |
| Un prémouillage est requis. | Le prémouillage n'est pas nécessaire pour les membranes en nylon. |
| Nature hydrophile | |
| Les membranes de nitrocellulose sont de nature hydrophile mais sont moins hydrophiles que les membranes de nylon. | Ils sont de nature hautement hydrophile. |
| Potentiel d'immobilisation | |
| Les membranes de nitrocellulose ont moins d'affinité pour les acides nucléiques. Mais il a une grande affinité pour les protéines. | Les membranes en nylon ont un potentiel de liaison avec les acides nucléiques plus élevé que les membranes en nitrocellulose. |
Résumé – Nitrocellulose vs Membrane Nylon
Les membranes de nitrocellulose et de nylon sont des feuilles spéciales utilisées dans la technique de buvardage pour reproduire le motif de bandes sur le gel. Ils permettent de détecter une séquence spécifique ou une protéine des mélanges en les immobilisant sur la membrane. Une fois les molécules immobilisées sur la membrane, celle-ci peut être utilisée comme substrat pour l'analyse d'hybridation avec des sondes marquées. La membrane de nitrocellulose est couramment utilisée pour la détection des protéines dans la technique de transfert Western en raison de sa forte affinité de liaison avec les protéines. Les membranes en nylon sont souvent utilisées pour le buvardage Southern et Northern. C'est la différence entre la nitrocellulose et la membrane en nylon.
