La principale différence entre l'élution isocratique et l'élution par gradient est que l'élution isocratique fait référence au maintien d'une concentration constante dans la phase mobile, tandis que l'élution par gradient fait référence au maintien d'une concentration variable dans la phase mobile.
Les termes élution isocratique et gradient sont utilisés en chromatographie. Lors d'une analyse chromatographique, nous utilisons une phase stationnaire, qui est une substance non mobile, ainsi qu'une phase mobile, la substance mobile. L'élution isocratique et gradient décrit les propriétés de la phase mobile.
Qu'est-ce que l'élution isocratique ?
L'élution isocratique est un terme utilisé en chromatographie lorsque la phase mobile a une concentration constante. Ici, la concentration de la phase mobile est constante tout au long du processus chromatographique. Dans ce processus, nous pouvons observer que la largeur du pic augmente avec le temps de rétention de manière linéaire dans le chromatogramme. Cependant, cela conduit à un inconvénient - les pics d'élution tardive pour l'élution tardive deviennent très plats et larges. Par conséquent, ces larges pics deviennent difficiles à reconnaître comme des pics.
De plus, en élution isocratique, la sélectivité ne change pas selon les dimensions de la colonne. Cela signifie que la sélectivité ne dépend pas des modifications des dimensions de la colonne. Ici, la longueur et le diamètre sont considérés comme des dimensions de colonne. Par conséquent, les pics éluent dans le même ordre.
Qu'est-ce que l'élution de gradient ?
L'élution par gradient est un terme utilisé en chromatographie lorsqu'ici la phase mobile a une concentration variable. En d'autres termes, la concentration de la phase mobile n'a pas à rester constante. Par exemple, en HPLC, une méthode de séparation courante utilise initialement du méthanol à 10 % et se termine à 90 %, en augmentant progressivement la concentration. La phase mobile a deux composants: un solvant faible et un solvant fort. Un solvant faible permet au soluté de s'éluer lentement tandis qu'un solvant fort provoque l'élution rapide du soluté. En chromatographie en phase inverse, nous utilisons l'eau comme solvant faible et le solvant organique comme solvant fort.
Figure 01: CLHP
De plus, la méthode d'élution par gradient diminue les composants d'élution ultérieurs pour les faire éluer plus rapidement, ce qui donne un pic étroit dans le chromatogramme. Cette méthode améliore également la forme et la hauteur du pic. De plus, dans la technique d'élution par gradient, l'ordre d'élution change avec les changements de dimensions de la colonne.
Quelle est la différence entre l'élution isocratique et gradient ?
Les termes élution isocratique et gradient sont utilisés en chromatographie. L'élution isocratique et gradient décrit les propriétés de la phase mobile. La principale différence entre l'élution isocratique et l'élution par gradient est que l'élution isocratique fait référence au maintien d'une concentration constante dans la phase mobile, tandis que l'élution par gradient fait référence au maintien d'une concentration variable dans la phase mobile.
Dans la technique d'élution isocratique, la largeur du pic augmente linéairement avec le temps de rétention. Cependant, dans la technique d'élution par gradient, la rétention des composants élués plus tard est diminuée, de sorte que l'élution devient plus rapide et donne des pics étroits. En dehors de cela, dans l'élution isocratique, la sélectivité ne dépend pas des dimensions de la colonne, mais dans l'élution par gradient, la sélectivité change avec l'évolution des dimensions de la colonne.
Le tableau suivant résume la différence entre l'élution isocratique et gradient.
Résumé - Élution Isocratique vs Gradient
L'élution isocratique et l'élution par gradient décrivent les propriétés de la phase mobile. La principale différence entre l'élution isocratique et l'élution par gradient est que l'élution isocratique fait référence au maintien d'une concentration constante dans la phase mobile, tandis que l'élution par gradient fait référence au maintien d'une concentration variable dans la phase mobile.
