Différence clé - Cytométrie en flux vs FACS
Dans le contexte de la théorie cellulaire, les cellules sont l'unité structurelle et fonctionnelle de base de tous les organismes vivants. Le tri cellulaire est une méthodologie utilisée pour séparer différentes cellules en fonction des caractéristiques physiologiques et morphologiques. Ils peuvent être de caractéristiques intracellulaires ou extracellulaires. L'interaction de l'ADN, de l'ARN et des protéines est considérée comme des propriétés interactives intracellulaires, tandis que la forme, la taille et les différentes protéines de surface sont considérées comme des propriétés extracellulaires. Dans la science moderne, les méthodologies de tri cellulaire ont permis d'aider les différentes investigations dans les études biologiques et aussi dans l'établissement de nouveaux principes à travers la recherche sur la médecine. Le tri cellulaire est effectué selon diverses méthodologies qui incluent à la fois des méthodologies primitives avec moins d'équipement et des méthodologies technologiques avancées avec l'utilisation de machines sophistiquées. La cytométrie en flux, le tri de cellules activées par fluorescence (FACS), la sélection de cellules magnétiques et le tri de cellules individuelles sont les principales méthodologies utilisées. La cytométrie en flux et le FACS sont développés pour différencier les cellules en fonction de leurs propriétés optiques. Le FACS est un type spécialisé de cytométrie en flux. La cytométrie en flux est une méthodologie utilisée lors de l'analyse d'une population hétérogène de cellules en fonction de différentes molécules de surface cellulaire, de leur taille et de leur volume, ce qui permet l'étude de cellules individuelles. FACS est un processus par lequel un mélange d'échantillons de cellules est trié en fonction de leurs caractéristiques de diffusion de la lumière et de fluorescence dans deux conteneurs ou plus. C'est la principale différence entre la cytométrie en flux et le FACS.
Qu'est-ce que la cytométrie en flux ?
La cytométrie en flux est une méthode utilisée pour examiner et déterminer l'expression de molécules intracellulaires et de la surface cellulaire et pour définir et caractériser des types cellulaires distincts. Il est également utilisé pour déterminer le volume et la taille des cellules et pour évaluer la pureté des sous-populations isolées. Cela permet l'évaluation multi-paramètres de cellules individuelles à peu près en même temps. La cytométrie en flux est utilisée pour mesurer l'intensité de la fluorescence produite par des anticorps marqués par fluorescence qui aident à identifier les protéines ou les ligands qui se lient aux cellules associées.
Figure 01: Cytométrie en flux
Généralement, la cytométrie en flux comprend principalement trois sous-systèmes. Ce sont la fluidique, l'électronique et l'optique. En cytométrie en flux, cinq composants principaux sont disponibles qui sont utilisés dans le tri cellulaire. Ce sont, une cellule d'écoulement (un flux de liquide qui est utilisé pour les transporter et aligner les cellules pour le processus de détection optique), un système de mesure (peut être de différents systèmes, y compris des lampes au mercure et au xénon, à haute puissance refroidies à l'eau ou lasers à faible puissance refroidis par air ou à diodes), un ADC; Système de convertisseur analogique-numérique, système d'amplification et ordinateur pour l'analyse. L'acquisition est le processus par lequel les données sont collectées à partir des échantillons à l'aide d'un cytomètre en flux. Ce processus est assisté par un ordinateur qui est relié au cytomètre en flux. Le logiciel présent dans l'ordinateur analyse les informations transmises à l'ordinateur à partir du cytomètre en flux. Le logiciel a également la capacité d'ajuster les paramètres de l'expérience contrôlant le cytomètre en flux.
Qu'est-ce que le FACS ?
Dans le contexte de la cytométrie en flux, le tri cellulaire activé par fluorescence (FACS) est une méthode utilisée pour différencier et trier un échantillon d'un mélange de cellules biologiques. Les cellules sont séparées de deux conteneurs ou plus. La méthode de tri est basée sur les caractéristiques physiques de la cellule, notamment les caractéristiques de diffusion de la lumière et de fluorescence de la cellule. Il s'agit d'une technique scientifique importante, qui peut être utilisée pour obtenir des résultats quantitatifs et qualitatifs fiables des signaux de fluorescence émis par chaque cellule. Au cours du FACS, dans un premier temps, le mélange pré-obtenu de cellules; une suspension est dirigée vers le centre d'un filet étroit de liquide qui s'écoule rapidement. Le flux de liquide est conçu pour séparer les cellules de la suspension en fonction du diamètre de chaque cellule. Un mécanisme de vibration est appliqué au flux de suspension, ce qui entraîne la formation de gouttelettes individuelles.
Figure 02: FACS
Le système est calibré afin de créer une seule gouttelette avec une cellule. Juste avant la formation de gouttelettes, la suspension de flux se déplace le long d'un appareil de mesure de fluorescence qui détecte la caractéristique de fluorescence de chaque cellule. Au point de formation des gouttelettes, un anneau de charge électrique est placé et une charge est induite sur l'anneau avant la mesure de l'intensité de fluorescence. Une fois que les gouttelettes sont formées à partir du flux de suspension, une charge est piégée dans les gouttelettes qui entre ensuite dans un système de déviation électrostatique. Selon la charge, le système dévie les gouttelettes dans différents conteneurs. La méthode d'application de la charge varie selon les différents systèmes utilisés dans le FACS. L'équipement utilisé dans le FACS est connu sous le nom de trieur de cellules activé par fluorescence.
Quelle est la similitude entre la cytométrie en flux et le FACS ?
La cytométrie en flux et le FACS sont développés pour différencier les cellules en fonction de leurs propriétés optiques
Quelle est la différence entre la cytométrie en flux et le FACS ?
Cytométrie en flux vs FACS |
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| La cytométrie en flux est une méthodologie utilisée lors de l'analyse d'une population hétérogène de cellules en fonction de différentes molécules de surface cellulaire, de leur taille et de leur volume, ce qui permet l'étude de cellules individuelles. | FACS est un processus par lequel un échantillon de mélange de cellules est trié en fonction de leurs caractéristiques de diffusion de la lumière et de fluorescence dans deux conteneurs ou plus. |
Résumé - Cytométrie en flux vs FACS
La cellule est l'unité structurelle et fonctionnelle de base de tous les organismes vivants. Le tri cellulaire est le processus par lequel les cellules sont isolées et différenciées en différentes catégories en fonction de leurs propriétés intracellulaires et extracellulaires. La cytométrie en flux et le FACS sont deux méthodologies importantes dans le tri cellulaire. Les deux processus sont développés pour différencier les cellules en fonction de leurs propriétés optiques. La cytométrie en flux est une méthodologie utilisée lors de l'analyse d'une population hétérogène de cellules en fonction de différentes molécules de surface cellulaire, de leur taille et de leur volume, ce qui permet l'étude de cellules individuelles. FACS est un processus par lequel un mélange d'échantillons de cellules est trié en fonction de leurs caractéristiques de diffusion de la lumière et de fluorescence dans deux conteneurs ou plus. C'est la différence entre la cytométrie en flux et le FACS.
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