Différence clé - Immunofluorescence vs Immunohistochimie
Le diagnostic des maladies, qui utilise des méthodes de biologie moléculaire, est devenu un domaine émergent de la technologie des laboratoires cliniques. Il comprend tous les tests et méthodes pour identifier une maladie et comprendre la cause d'une maladie en analysant l'ADN, l'ARN ou les protéines exprimées dans un organisme. Les progrès rapides du diagnostic moléculaire ont permis la recherche fondamentale sur les maladies transmissibles et non transmissibles. Ceux-ci sont utilisés pour déterminer les changements dans la séquence ou les niveaux d'expression dans les gènes ou protéines cruciaux impliqués dans la maladie. L'immunofluorescence (IF) et l'immunohistochimie (IHC) sont deux de ces techniques largement utilisées en biologie du cancer. IF est un type d'IHC où une méthode de détection par fluorescence est utilisée pour analyser les anticorps monoclonaux et polyclonaux, tandis que l'IHC utilise des méthodes chimiques pour détecter les anticorps monoclonaux et polyclonaux. C'est la principale différence entre IF et IHC.
Qu'est-ce que l'immunofluorescence (IF) ?
L'immunofluorescence est une technique de détection dans laquelle les anticorps utilisés dans le test sont marqués à l'aide de colorants fluorescents ou de protéines fluorescentes à des fins de détection. Les anticorps secondaires marqués peuvent entraîner des signaux de fond indésirables; par conséquent, la technique IF est basée sur le marquage de l'anticorps primaire lui-même à l'heure actuelle afin d'éviter les signaux indésirables lors de la détection. Grâce à cette technique, la liaison non spécifique entre l'anticorps primaire et l'anticorps secondaire est empêchée, et elle est plus rapide car il n'y a pas d'étape d'incubation secondaire impliquée. La qualité des données est également améliorée.
Figure 01: Double coloration par immunofluorescence pour BrdU, NeuN et GFAP
Les fluorochromes ou colorants fluorescents sont des composés capables d'absorber les rayonnements, de préférence les rayonnements ultraviolets excités. Lorsque les particules atteignent l'état fondamental à partir de l'état excité, elles émettent un rayonnement qui est capté et détecté par un détecteur pour former un spectre. Il est très important que le marqueur fluorescent soit compatible et stable pour la réaction particulière et qu'il soit correctement conjugué à l'anticorps afin d'obtenir des résultats précis. L'un des fluorochromes les plus utilisés est l'isothiocyanate de fluorescéine (FITC), qui est de couleur verte, avec des longueurs d'onde maximales d'absorption et d'émission de 490 nm et 520 nm, respectivement. La rhodamine, un autre agent utilisé en IF, est de couleur rouge et a des longueurs d'onde de pic d'absorption et d'émission distinctes de 553 nm et 627 nm.
Qu'est-ce que l'immunohistochimie (IHC) ?
IHC est une méthode de test moléculaire pratiquée afin d'identifier et de confirmer la présence de l'antigène dans la cellule cible. La cellule cible peut être une particule infectieuse, un agent pathogène microbien ou une cellule tumorale maligne. L'IHC utilise des anticorps monoclonaux et polyclonaux pour déterminer la présence d'antigènes présents sur la surface cellulaire des cellules cibles. La technique est basée sur la liaison antigène-anticorps. Un marqueur de détection est conjugué à ces anticorps afin de détecter la présence ou l'absence de l'antigène particulier. Ces marqueurs peuvent être des marqueurs chimiques tels que des enzymes, des anticorps marqués par fluorescence ou des anticorps radiomarqués.
Figure 02: Tranche de cerveau de souris colorée par immunohistochimie
L'application la plus populaire de l'IHC est la biologie des cellules cancéreuses pour identifier la présence de tumeurs malignes, mais elle est également utilisée pour la détection de maladies infectieuses.
Quelles sont les similitudes entre l'immunofluorescence et l'immunohistochimie ?
- L'immunofluorescence et l'immunohistochimie ont lieu dans des conditions in vitro.
- Les deux techniques sont basées sur l'antigène-anticorps
- Les deux sont des techniques très rapides.
- Les résultats des techniques sont reproductibles.
- Les deux ont amélioré la qualité des données.
- Ces techniques utilisées dans le diagnostic du cancer et des maladies infectieuses.
Quelle est la différence entre l'immunofluorescence et l'immunohistochimie ?
Immunofluorescence vs Immunohistochimie |
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| IF est une technique de détection dans laquelle les anticorps utilisés dans le test sont marqués à l'aide de colorants fluorescents ou de protéines fluorescentes pour la détection. | IHC est une technique de détection dans laquelle les anticorps utilisés dans le test sont marqués à l'aide de produits chimiques ou d'éléments radioactifs pour la détection. |
| Précision | |
| La précision est plus élevée dans la technique IF par rapport à l'IHC. | La précision est plus faible en IHC. |
| Spécificité | |
| SI est plus spécifique. | IHC est moins spécifique. |
Résumé – Immunofluorescence vs Immunohistochimie
Les mécanismes moléculaires ont entraîné de nombreux changements dans le domaine de la médecine, donnant naissance à des méthodes de test moléculaire avancées qui ont révolutionné le domaine du diagnostic. Ces inventions ont conduit à une identification et une confirmation rapides et précises de la maladie, permettant ainsi l'administration et la production réussies de médicaments. Ces techniques sont également utilisées en pharmacologie afin de trouver les cibles des médicaments et de confirmer les propriétés pharmacocinétiques du médicament au cours du métabolisme du médicament. L'IF et l'IHC sont deux méthodes de diagnostic basées sur le concept de liaison à l'antigène et à l'anticorps, bien que le mode de détection dans les deux techniques diffère. IF utilise le principe de fluorescence pour détecter l'antigène et IHC utilise le concept de conjugaison chimique pour détecter l'antigène. C'est la différence entre IF et IHC.
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