Différence clé - Hybridation in situ vs immunohistochimie
Le diagnostic du cancer et des maladies infectieuses est une tendance populaire où de nouvelles techniques basées sur la protéomique et la génomique sont utilisées dans le but d'identifier les tumeurs ou les cellules infectieuses, leur prolifération et les sites de développement cellulaire et d'analyser la base génétique des plus transmissibles et les maladies non transmissibles. Cela se traduira par un traitement et une conception précis des médicaments et par le développement de thérapies personnalisées pour les maladies. L'hybridation in situ (ISH) et l'immunohistochimie (IHC) sont deux techniques largement utilisées en biologie du cancer et la principale différence entre l'hybridation in situ et l'immunochimie réside dans les molécules utilisées dans la procédure d'analyse. Dans l'ISH, les sondes d'acide nucléique sont utilisées dans l'analyse tandis que dans l'IHC, les anticorps monoclonaux et polyclonaux sont utilisés pour les déterminations diagnostiques.
Qu'est-ce que l'hybridation in situ (ISH) ?
L'hybridation in situ est une technique d'hybridation d'acides nucléiques qui s'effectue directement sur une portion ou section de tissu, dans le tissu entier ou dans les cellules. La technique dépend de la théorie de l'appariement de bases complémentaires de Watson Crick, résultant en des hybrides ADN-ADN ou des hybrides ADN-ARN qui peuvent détecter des gènes mutés ou identifier le gène d'intérêt requis. Des séquences d'ADN simple brin, des séquences d'ADN double brin, des séquences d'ARN simple brin ou des séquences d'oligonucléotides synthétiques sont utilisées comme sondes pendant la technique d'hybridation, et ces sondes sont marquées avec un phosphore radioactif à son extrémité 5' pour les procédures d'identification par autoradiographie ou marquées à l'aide de colorants fluorescents. Il existe différents types de techniques ISH disponibles en fonction du type de sonde utilisée et du type de technique de visualisation suivie.
Figure 01: Hybridation fluorescente in situ
Il existe de nombreuses applications de l'ISH, principalement dans le diagnostic moléculaire des maladies infectieuses afin d'identifier la présence d'agents pathogènes et de confirmer l'agent pathogène via des diagnostics moléculaires. Il est également utilisé dans les domaines de la biologie du développement, du caryotypage et de l'analyse phylogénétique et de la cartographie physique des chromosomes.
Qu'est-ce que l'immunohistochimie (IHC) ?
Dans la technique de l'IHC, la principale molécule analysée est l'antigène. Au cours de l'IHC, des anticorps monoclonaux et polyclonaux sont utilisés pour déterminer la présence d'antigènes lors de l'infection ou de l'état de prolifération des cellules malignes. La technique est basée sur la liaison antigène-anticorps et des marqueurs enzymatiques sont utilisés pour cette technique; l'une de ces applications est l'ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay). Les marqueurs peuvent également être des anticorps marqués par fluorescence ou des anticorps radiomarqués.
Figure 02: Immunohistochimie
IHC est largement utilisé pour la détection des cellules cancéreuses. Les procédures de diagnostic ciblent les antigènes présents sur les cellules tumorales pour identifier et caractériser la tumeur. La même procédure est incorporée pour diagnostiquer les agents infectieux. Les anticorps monoclonaux et polyclonaux sont également utilisés pour analyser différents produits géniques en permettant la réaction de liaison anticorps-antigène entre la protéine souhaitée et l'anticorps synthétique administré.
Quelles sont les similitudes entre l'hybridation in situ et l'immunohistochimie ?
- ISH et IHC sont des réactions hautement spécifiques.
- Les deux techniques sont très précises.
- Les deux techniques peuvent être utilisées dans le diagnostic du cancer et des maladies infectieuses.
- Ces techniques sont réalisées dans des environnements stériles in vitro.
- Les deux sont des techniques rapides qui fournissent des résultats reproductibles.
- ISH et IHC utilisent des méthodes de détection telles que le marquage radio et les techniques de fluorescence.
Quelle est la différence entre l'hybridation in situ et l'immunohistochimie ?
Hybridation In Situ vs Immunohistochimie |
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| ISH est une technique d'hybridation d'acide nucléique qui est directement effectuée sur une portion ou une section de tissu ou sur l'ensemble du tissu. | IHC est une technique où des anticorps monoclonaux et polyclonaux sont utilisés pour déterminer la présence d'antigènes, qui sont des marqueurs protéiques spéciaux placés sur les surfaces cellulaires. |
| Type de biomolécules analysées | |
| ISH analyse les acides nucléiques. | L'IHC analyse les protéines-antigènes. |
| Base de la réaction biochimique | |
| L'appariement de bases complémentaires entre ADN-ADN ou ADN-ARN se produit dans cette technique. | Les interactions antigène-anticorps sont impliquées dans l'immunohistochimie. |
| Méthodes de détection liées aux enzymes | |
| Les méthodes de détection liées aux enzymes ne peuvent pas être utilisées dans ISH. | Les méthodes de détection liées aux enzymes peuvent être utilisées en IHC. |
Résumé – Hybridation In Situ vs Immunohistochimie
Les diagnostics moléculaires sont des méthodes rapides et de confirmation qui peuvent être utilisées pour identifier une maladie non transmissible telle que le cancer ou une maladie transmissible telle que le VIH ou la tuberculose sur la base des marqueurs moléculaires présents sur les cellules qui conduisent à la manifestation de la maladie. Les marqueurs moléculaires peuvent être présents sous la forme de protéines exprimées ou au niveau génétique sur la base desquels différentes nouvelles techniques sont introduites pour augmenter l'efficacité et sont moins laborieuses, bien que ces techniques aient un coût élevé. Ainsi, l'ISH dépend de la formation d'hybrides ADN-ADN ou ADN-ARN, et l'IHC dépend des réactions spécifiques entre l'anticorps et l'antigène. C'est la différence entre l'hybridation in situ.
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