La principale différence entre le test BCA et Bradford est que le test BCA prend du temps et est moins précis, tandis que le test Bradford est rapide et précis.
BCA et le test de Bradford sont deux méthodes de dosage de la détermination de la concentration en protéines. Ces deux tests ont des principes de test différents et des différences dans leurs précisions.
Qu'est-ce que le test BCA ?
Le dosage BCA ou dosage de l'acide bicinchoninique est un dosage biochimique utile pour déterminer la concentration totale de protéines dans une solution. Cette méthode porte également le nom de dosage de Smith d'après son inventeur, Paul K. Smith. Cette méthode analytique présente des similitudes avec le dosage des protéines de Lowry, le dosage des protéines de Bradford ou le réactif biuret. Nous pouvons observer la concentration totale de protéines dans un échantillon donné grâce à un changement de couleur de la solution d'échantillon, qui passe du vert au violet. Ce changement de couleur se produit proportionnellement à la teneur en protéines. Ensuite, nous pouvons utiliser une technique colorimétrique pour analyser l'intensité de la couleur et la teneur en protéines de l'échantillon.
Méthode BCA d'estimation des protéines
Lorsque l'on considère le mécanisme du dosage BCA, la solution BCA typique contient une solution hautement alcaline avec un pH de près d'environ 11,25, et les ingrédients de cette solution comprennent l'acide bicinchoninique, le carbonate de sodium, le bicarbonate de sodium, le tartrate de sodium et sulfate de cuivre(II) pentahydraté. Ce dosage dépend principalement de deux réactions chimiques: la réduction du cuivre(II) en cuivre(I) par les liaisons peptidiques dans les protéines et la chélation de deux molécules d'acide bicinchoninique avec l'ion cuivre(I), résultant en un complexe de couleur violette qui peut absorber la lumière à une longueur d'onde de 562 nm. Dans la première réaction, la quantité de cuivre(II) réduite par les liaisons peptidiques est proportionnelle à la quantité de protéines dans l'échantillon.
Qu'est-ce que le test de Bradford ?
Le test de Bradford est une méthode d'analyse spectroscopique utile pour mesurer la concentration de protéines dans une solution. Cette méthode a été développée par Marion M. Bradford en 1976, et c'est une méthode relativement rapide et précise.
Réaction colorée de la protéine et du réactif de Bradford
Nous pouvons utiliser cette méthode pour déterminer la concentration de la quantité de protéines dans un échantillon. La réaction chimique qui se produit dans l'échantillon au cours de ce test dépend uniquement de la composition en acides aminés de la protéine dans l'échantillon.
Méthode Bradford d'estimation des protéines
Lorsque l'on considère la méthode de ce dosage, il s'agit d'un dosage colorimétrique des protéines basé sur le décalage d'absorbance du colorant nommé Coomassie Brilliant Blue G-250. Généralement, ce colorant existe sous trois formes: la forme anionique (bleue), la forme neutre (verte) et la forme cationique (rouge). Par conséquent, dans des conditions acides, le colorant change de couleur du rouge au bleu. Ceci est dû à la liaison de la protéine avec le colorant. En revanche, s'il n'y a pas de protéine à lier au colorant, le changement de couleur n'apparaît pas, la solution prend une couleur rouge-brun. Ce colorant est capable de former un complexe puissant et non covalent avec le groupe carboxyle de la protéine grâce aux forces de Van der Waal et aux attractions électrostatiques.
Quelle est la différence entre BCA et Bradford Assay ?
BCA et le test de Bradford sont deux méthodes de dosage de la détermination de la concentration en protéines. Ces deux dosages ont des principes de dosage différents et des différences dans leurs précisions. La principale différence entre le test BCA et Bradford est que le test BCA prend du temps et est moins précis, tandis que le test Bradford est rapide et précis.
L'infographie suivante résume les différences entre les tests BCA et Bradford sous forme de tableau.
Résumé - BCA vs Bradford Assay
Le dosage BCA ou dosage de l'acide bicinchoninique est un dosage biochimique utile pour déterminer la concentration totale de protéines dans une solution. Le test de Bradford est une méthode d'analyse spectroscopique utile pour mesurer la concentration de protéines dans une solution. La principale différence entre le test BCA et Bradford est que le test BCA prend du temps et est moins précis, tandis que le test Bradford est rapide et précis.
