Différence entre le dosage des protéines Bradford et Lowry

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Différence entre le dosage des protéines Bradford et Lowry
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Vidéo: biochimie structurale : travaux pratique 3 (deuxième partie) dosage des protéines 2024, Novembre
Anonim

La principale différence entre le dosage des protéines Bradford et Lowry est que le dosage des protéines Bradford est basé sur le décalage d'absorbance du colorant bleu brillant de Coomassie G-250 tandis que le dosage des protéines Lowry est basé sur la réaction des ions cuivre (Cu+) produit par l'oxydation des liaisons peptidiques avec le réactif de Folin–Cioc alteu.

Un test est une technique analytique qui permet de caractériser les principaux composants fonctionnels d'un échantillon. Par conséquent, un test peut être un test qualitatif ou quantitatif. De nombreux domaines, notamment la médecine de laboratoire, la pharmacologie, la biologie environnementale, la biologie moléculaire, la biochimie et l'immunologie, utilisent régulièrement ce type de tests. Les tests de protéines de Bradford et Lowry sont deux tests biochimiques qui déterminent la concentration de protéines dans une solution d'échantillon. Les deux tests utilisent des techniques colorimétriques pour fournir des résultats.

Qu'est-ce que le Bradford Protein Assay ?

Bradford protein assay est une procédure d'analyse spectroscopique rapide pour l'analyse des protéines. Il montre une grande précision lors de la mesure de la concentration de protéines dans une solution. Marion Bradford a introduit cette procédure en 1976. Dans ce test, la réaction totale est basée sur la composition en acides aminés des protéines mesurées. En d'autres termes, le dosage des protéines de Bradford est un dosage colorimétrique. Il utilise le colorant bleu brillant de Coomassie. Par conséquent, ce dosage protéique colorimétrique dépend du décalage d'absorbance du colorant. Le bleu brillant de Coomassie G-250 existe en trois formats: cationique (rouge), anionique (bleu) et neutre (vert). Dans des conditions acides, la forme rouge du colorant est convertie en bleu. Il confirme la liaison de la protéine. Si la protéine n'est pas présente, la solution peut rester de couleur brune.

Différence entre le dosage des protéines Bradford et Lowry
Différence entre le dosage des protéines Bradford et Lowry

Figure 01: Test de protéine de Bradford

Le test de protéines de Bradford diffère des autres tests de protéines car il est moins sensible aux interférences de divers composés chimiques présents dans la solution de protéines. Ces composés comprennent le sodium, le potassium, le glucose et le saccharose, etc.

Qu'est-ce que le dosage des protéines Lowry ?

Lowry protein assay est un dosage biochimique utilisé pour déterminer le niveau total de protéines dans une solution. Oliver H. Lowry est la personne qui a développé ce réactif en 1940. La procédure représente la concentration totale de protéines de la solution par un changement de couleur qui est proportionnel à la concentration de protéines dans la solution. Par conséquent, il s'agit également d'un dosage colorimétrique des protéines.

La réaction entre les ions cuivre (Cu+) produits par l'oxydation des liaisons peptidiques et le réactif de Folin–Cioc alteu est à la base de cette procédure. De plus, ce réactif contient de l'acide phosphomolybdique et de l'acide phosphoro-tungstique. Cependant, le mécanisme de réaction du dosage des protéines de Lowry n'est pas bien compris. Mais cela implique l'oxydation des résidus de cystéine, de tryptophane et de tyrosine par la réduction du réactif de Folin-Cioc alteu.

Différence clé - dosage des protéines Bradford vs Lowry
Différence clé - dosage des protéines Bradford vs Lowry

Figure 02: Dosage des protéines de Lowry

Les résidus de cystéine contribuent à l'absorbance observée dans le dosage des protéines de Lowry et la réaction aboutit à une molécule bleue brillante; hétéropoly bleu de molybdène. La réduction de cette molécule est mesurée par absorbance à 660nm. Par conséquent, la concentration de résidus de cystéine et de tryptophane qui a réduit le réactif de Folin-Cioc alteu déduit la concentration totale de la protéine dans la solution.

Quelles sont les similitudes entre Bradford et Lowry Protein Assay ?

  • Les tests de protéines de Bradford et Lowry déterminent la concentration de protéines dans une solution.
  • Les deux méthodes sont des méthodes colorimétriques.
  • De plus, la sensibilité des deux méthodes est élevée.

Quelle est la différence entre le dosage des protéines Bradford et Lowry ?

Les dosages de protéines de Bradford et Lowry sont deux types de dosages qui déterminent la concentration de protéines dans une solution. Le dosage des protéines de Bradford repose sur le décalage d'absorbance du colorant bleu brillant de Coomassie G-250 tandis que le dosage des protéines de Lowry dépend de la réaction des ions cuivre produits par l'oxydation des liaisons peptidiques, avec le réactif de Folin-Cioc alteu. C'est donc la principale différence entre le dosage des protéines Bradford et Lowry. Le dosage des protéines de Bradford prend 15 minutes pour produire un résultat tandis que le dosage des protéines de Lowery prend 40 à 60 minutes pour produire un résultat. Il s'agit donc d'une autre différence entre le dosage des protéines Bradford et Lowry. De plus, le dosage des protéines Bradford dépend de la composition en acides aminés tandis que le dosage des protéines Lowry dépend partiellement de la composition en acides aminés. Par conséquent, il s'agit également d'une différence entre le dosage des protéines de Bradford et Lowry.

L'infographie ci-dessous fournit plus de détails sur la différence entre le dosage des protéines Bradford et Lowry.

Différence entre le dosage des protéines Bradford et Lowry - Forme tabulaire
Différence entre le dosage des protéines Bradford et Lowry - Forme tabulaire

Résumé - Essai de protéines Bradford vs Lowry

Un test est une technique analytique utilisée pour caractériser le composant fonctionnel majeur d'un échantillon. Les dosages de protéines de Bradford et Lowry sont deux types de dosages de protéines qui fonctionnent selon des techniques colorimétriques. Les dosages de protéines Bradford et Lowry déterminent la concentration en protéines dans une solution. Cependant, la principale différence entre Bradford et Lowry Protein Assay réside dans la technique colorimétrique qu'ils utilisent. Le dosage des protéines de Bradford utilise le bleu brillant de Coomassie G-250 tandis que le dosage des protéines de Lowry utilise des ions de cuivre (Cu+) et un réactif de Folin-Cioc alteu. De plus, la méthode de Bradford donne des résultats rapides par rapport au dosage des protéines de Lowry. Cependant, les deux méthodes sont des méthodes très sensibles et sont sujettes aux interférences de diverses substances.

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