La principale différence entre le test du micronoyau et le test des comètes est que le test du micronoyau est important pour vérifier les dommages chromosomiques résultant d'une exposition au mutagène, tandis que le test des comètes est important pour détecter les dommages primaires à l'ADN dans les cellules individuelles.
Les tests de génotoxicité permettent d'évaluer les possibilités de mutations et d'anomalies chromosomiques. Les génotoxines comprennent les substances chimiques et les radiations. Les agents cancérigènes, mutagènes et tératogènes sont les principales catégories de génotoxines. Ils provoquent divers dommages tels que des mutations ponctuelles, des délétions, des cassures simple et double brin, des aberrations chromosomiques, des formations de micronoyaux, la réparation de l'ADN et des interactions du cycle cellulaire. De telles conditions peuvent conduire à une grande variété de maladies, et les tests de génotoxicité préviennent les dommages potentiels de ces conditions. Le test du micronoyau et le test des comètes sont deux techniques dans le cadre des tests de génotoxicité.
Qu'est-ce que le dosage du micronoyau ?
Le test du micronoyau est un test permettant d'évaluer les dommages chromosomiques résultant d'une exposition aux mutagènes. Il est important dans le criblage des produits chimiques qui provoquent la formation de fuseaux et de micronoyaux. Un test du micronoyau fournit des informations sur la stabilité des produits chimiques lorsqu'ils interfèrent avec la structure et la fonction des chromosomes. De nombreux cancérogènes sont testés positifs dans les tests du micronoyau. Le processus de dosage implique un traitement chimique et la mesure de la fréquence des cellules micronucléées. S'il y a une augmentation anormale du nombre de cellules de micronoyaux, il conclut que le produit chimique induit des dommages chromosomiques.
Un test du micronoyau est généralement effectué sur des cellules en division active. Par conséquent, les érythrocytes et les cellules souches de la moelle osseuse produites par divisions cellulaires sont des candidats idéaux pour de tels tests. Ils connaissent un roulement constant et rapide. Étant donné que les érythrocytes n'ont pas de vrais noyaux, cela rend les cellules micronucléées plus visibles à la fin du test.
Figure 01: Observation du dosage du micronoyau
Les dosages du micronoyau sont économiques, plus rapides, pratiques et nécessitent moins de compétences. Ils reflètent rapidement les aberrations chromosomiques de manière fiable et sont extrêmement utiles pour évaluer rapidement les dommages chromosomiques. Un type spécial et polyvalent de dosage du micronoyau est le dosage du cytome du micronoyau par bloc de cytokinèse (CBMNcyt). C'est le test préférable pour mesurer les dommages chromosomiques et l'instabilité dans les cellules. Cependant, le principal problème de l'utilisation du test du micronoyau est qu'il est incapable de déterminer différents types d'aberrations chromosomiques, et le test a une influence sur le taux mitotique et la proportion de mort cellulaire, ce qui modifie les résultats.
Qu'est-ce que le Comet Assay ?
Le test Comet, également connu sous le nom de test d'électrophorèse sur gel unique, est une technique simple et sensible pour détecter les dommages à l'ADN. Il mesure les cassures de l'ADN dans les cellules eucaryotes et constitue une technique standard de biosurveillance et de test de génotoxicité.
Le test des comètes est impliqué dans l'encapsulation de cellules dans des suspensions d'agarose à bas point de fusion, la lyse de cellules dans des conditions neutres ou alcalines et l'électrophorèse de cellules lysées en suspension. Pendant le processus d'encapsulation, les cellules sont suspendues dans de l'agarose fondu à bas point de fusion, et l'agarose forme une matrice de fibres glucidiques pour les ancrer en place. L'agarose est osmotiquement neutre; par conséquent, il permet aux solutions de pénétrer à travers le gel et d'affecter les cellules sans les perturber ni les déplacer. La solution de lyse est une solution saline aqueuse hautement concentrée et un détergent. Ce sel perturbe les protéines et les schémas de liaison dans la cellule tout en perturbant le contenu en ARN de la cellule. Les cellules se détruisent et toutes les protéines, l'ARN, les constituants cytoplasmiques et nucléoplasmiques, se désintègrent et se diffusent dans la matrice d'agarose, laissant l'ADN.
Figure 02: Essai de comète
La solution d'électrophorèse est une solution alcaline où la double hélice d'ADN se dénature et le nucléoïde devient simple brin. Au cours de ce processus, un champ électrique est appliqué pour analyser les images. L'analyse d'image mesure l'intensité globale de la fluorescence pour l'ADN et le nucléoïde et compare les deux. La structure globale ressemble à une comète avec une tête circulaire correspondant à l'ADN non endommagé restant et une queue pour l'ADN endommagé. Plus la queue est brillante et longue en raison de signaux plus forts, plus le niveau de dégâts est élevé.
Quelles sont les similitudes entre le test du micronoyau et celui des comètes ?
- Micronucleus et le test des comètes sont économiques, plus rapides, pratiques et nécessitent moins de compétences.
- Elles sont principalement effectuées sur l'ADN.
- Les deux tests aident à évaluer les mutations et les anomalies chromosomiques.
- De plus, les deux techniques utilisent des produits chimiques pour effectuer la procédure.
Quelle est la différence entre le dosage des micronoyaux et celui des comètes ?
Le test du micronoyau est important pour vérifier les dommages chromosomiques résultant de l'exposition aux mutagènes, tandis que le test des comètes est important pour détecter les dommages primaires à l'ADN dans les cellules individuelles. C'est donc la principale différence entre le dosage du micronoyau et celui des comètes. En outre, le dosage du micronoyau est bien établi pour détecter la clastogénicité et l'aneugénicité. Le test des comètes est utilisé comme test de génotoxicité pour détecter les dommages primaires à l'ADN dans les cellules. De plus, un test de micronoyau fournit des informations sur la stabilité des produits chimiques, tandis qu'un test de comète est une électrophorèse sur gel monocellulaire.
L'infographie ci-dessous présente les différences entre le test du micronoyau et celui des comètes sous forme de tableau pour une comparaison côte à côte.
Résumé - Micronoyau vs Comet Assay
Les tests de génotoxicité permettent d'évaluer les possibilités de mutations et d'anomalies chromosomiques. Le test du micronoyau et le test des comètes sont deux techniques dans le cadre des tests de génotoxicité. Le test du micronoyau évalue les dommages chromosomiques à la suite d'une exposition aux mutagènes. Le test des comètes est une technique simple et sensible pour détecter les dommages à l'ADN. C'est donc la principale différence entre le test du micronoyau et celui des comètes. Le dosage du micronoyau est important dans le dépistage des produits chimiques qui provoquent la formation de fuseaux et de micronoyaux. Le test Comet est impliqué dans l'encapsulation de cellules dans des suspensions d'agarose à bas point de fusion, la lyse de cellules dans des conditions neutres ou alcalines et l'électrophorèse de cellules lysées en suspension.
