Différence clé - ELISA direct vs indirect
Un dosage immunoenzymatique (ELISA), également connu sous le nom de dosage immunoenzymatique, est un test sérologique qui détecte les anticorps dans le sang. Il est utilisé comme outil de diagnostic pour savoir si le patient a été exposé à un type particulier de virus ou à un autre agent infectieux (antigène) et si l'organisme a produit des anticorps contre l'infection. ELISA peut également identifier les infections passées et actuelles. Par conséquent, ELISA est souvent utilisé comme test de présélection par les médecins avant une analyse approfondie des maladies. Ce test peut être réalisé en laboratoire en prélevant un échantillon de sang sur le patient. Il existe deux types de test ELISA: ELISA direct et ELISA indirect. La principale différence entre ELISA direct et indirect est que l'ELISA indirect est plus sensible et nécessite l'ajout d'un anticorps secondaire, tandis que l'ELISA direct est moins sensible et n'utilise qu'un anticorps primaire.
Qu'est-ce que l'ELISA direct ?
ELISA est un test de diagnostic de la maladie effectué pour identifier la présence d'antigènes ou d'anticorps particuliers dans le sang. Il se fait sous la forme d'un essai sur plaque. Il utilise des anticorps liés à des enzymes facilement dosables. La présence d'antigènes dans l'échantillon de sérum se lie à des anticorps spécifiques liés à des enzymes. Dans la dernière étape, un substrat spécifique est ajouté pour réagir avec l'enzyme. L'enzyme convertit le substrat en un produit coloré ou produisant un signal. Le changement de couleur du substrat chimique révèle la présence d'un anticorps particulier dans l'échantillon de sérum. Le test ELISA direct utilise uniquement un anticorps primaire lié à l'enzyme. En se liant à l'antigène, il change rapidement de couleur, indiquant la présence de l'agent infectieux dans le sang. Cependant, l'intensité des signaux est plus faible en ELISA direct puisque les épitopes sont limités à la liaison des antigènes. Par conséquent, l'ELISA direct est moins sensible que l'ELISA indirect.
Figure 01: Test ELISA direct
Qu'est-ce que l'ELISA indirect ?
ELISA peut être réalisé en utilisant deux types d'anticorps à savoir; anticorps primaire et anticorps secondaire. L'outil ELISA indirect utilise les deux types d'anticorps pour amplifier les signaux pour une meilleure détection. La technique ELISA indirecte est réalisée comme suit.
- Les plaques sont incubées avec des antigènes et lavées pour bloquer la liaison non spécifique.
- Ensuite, les anticorps primaires sont ajoutés et lavés.
- Les anticorps secondaires liés aux enzymes sont ajoutés et lavés.
- Un substrat est ajouté et laissé réagir avec les enzymes.
- Les signaux sont détectés et la présence ou l'absence de l'antigène spécifique dans l'échantillon est identifiée.
Dans le test ELISA indirect, plusieurs anticorps secondaires peuvent se lier à un seul anticorps primaire. Les anticorps secondaires sont liés à des enzymes facilement dosables. Par conséquent, une liaison peut émettre un signal fort en raison de plusieurs interactions. Par conséquent, l'ELISA indirect est plus sensible que l'ELISA direct. Cependant, ELISA indirect peut émettre des signaux non spécifiques en raison de réactions croisées des anticorps secondaires.
Figure 02: Test ELISA indirect
Quelle est la différence entre ELISA direct et indirect ?
ELISA direct vs indirect |
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| L'ELISA direct est moins sensible que l'ELISA indirect. | L'ELISA indirect est plus sensible. |
| Temps pris | |
| Le test ELISA direct est un processus rapide. | L'ELISA indirect prend du temps. |
| Utilisation d'anticorps | |
| Un seul type d'anticorps (anticorps primaires) est utilisé en ELISA direct. | Les anticorps primaires et secondaires sont utilisés pour l'ELISA indirect. |
| Lien avec les enzymes | |
| Les anticorps primaires sont liés à des enzymes. | Les anticorps secondaires sont liés à des enzymes. |
| Réactivité croisée des seconds anticorps | |
| ELISA direct élimine la réactivité croisée des seconds anticorps. | L'ELISA indirect est affecté par la réactivité croisée des seconds anticorps. |
| Signaux | |
| Les signaux sont faibles par rapport à l'ELISA indirect. | Les signaux sont amplifiés en ELISA indirect. Par conséquent, il est facile à détecter. |
Résumé - ELISA direct vs indirect
ELISA est une technique biochimique utilisée principalement en immunologie pour détecter la présence d'un anticorps ou d'un antigène dans un échantillon de sang d'un patient. Elle peut être réalisée via deux procédés appelés ELISA direct ou indirect. Le test ELISA direct utilise uniquement des anticorps primaires pour détecter l'antigène, tandis que l'ELISA indirect utilise à la fois des anticorps primaires et secondaires. Dans ELISA direct, les anticorps primaires sont marqués alors que dans ELISA indirect, les anticorps secondaires sont marqués. C'est la différence entre ELISA direct et indirect.
