Différence clé - Marqueur sélectionnable vs gène rapporteur
La technique de génie génétique est utilisée pour transférer des gènes importants d'un organisme à un autre organisme. L'insertion d'un gène étranger dans le génome d'un autre organisme et son expression dans la cellule hôte sont les étapes les plus difficiles du transfert de gène. Pour détecter le succès du processus de transformation, un marqueur sélectionnable et un gène rapporteur sont utilisés dans la molécule recombinante. Un marqueur sélectionnable est une séquence d'ADN ou un gène qui exprime et sélectionne les cellules transformées à partir des cellules non transformées. Un gène rapporteur est un autre gène qui est utilisé pour distinguer les cellules transformées et pour quantifier ou détecter le fonctionnement du gène inséré dans l'hôte.le différence clé entre le marqueur sélectionnable et le gène rapporteur est que le marqueur sélectionnable est utilisé pour filtrer les cellules non transformées et pour signaler les cellules transformées tandis que le gène rapporteur est utilisé pour quantifier le niveau d'expression du gène chez l'hôte.
Qu'est-ce qu'un marqueur sélectionnable ?
En génie génétique, le gène d'intérêt est inséré dans un vecteur approprié et transformé en organismes hôtes. Cependant, la transformation n'est réussie que dans les cellules hôtes compétentes, et il existe une possibilité que les cellules hôtes rejettent l'absorption d'ADN étranger. Par conséquent, la différenciation des cellules transformées et non transformées est importante pour poursuivre l'expérimentation. Par conséquent, les chercheurs incorporent un gène marqueur sélectionnable au vecteur pour une sélection facile des cellules transformées à partir de cellules non transformées. Un marqueur sélectionnable est une séquence d'ADN, en particulier un gène utile dans l'identification des cellules transformées. Ce gène marqueur présente un trait qui convient à une sélection artificielle de cellules transformées à partir de cellules non transformées sur un milieu.
Les marqueurs sélectionnables les plus couramment utilisés en biologie moléculaire sont les gènes de résistance aux antibiotiques. Un gène de résistance aux antibiotiques est inséré dans le vecteur et transformé dans des cellules hôtes en particulier pour la bactérie hôte. Cet antibiotique particulier est incorporé dans le milieu de culture de la bactérie. En raison de la présence du marqueur sélectif, dans les conditions sélectives, seules les cellules qui contiennent le marqueur sélectionnable approprié peuvent survivre. Les cellules non transformées sont incapables de croître dans le milieu contenant l'antibiotique. Par conséquent, grâce au marqueur sélectionnable résistant aux antibiotiques, les cellules transformées sont facilement identifiées.
Gènes qui confèrent des traits pour les antimétabolites, les herbicides sont utilisés comme marqueurs sélectifs dans les vecteurs de clonage dans le génie génétique des plantes. Cependant, cette cotransformation de marqueurs sélectifs en organismes génétiquement modifiés a des effets négatifs sur l'environnement et l'homme. La libération de bactéries résistantes aux antibiotiques peut augmenter la résistivité aux antibiotiques des agents pathogènes humains. Il peut contaminer le produit ou la biomasse par des antibiotiques et perdre la pression sélective en raison de la dégradation et de l'inactivation des antibiotiques.
Figure 01: Vecteur plasmidique pour le transfert de gène avec marqueur sélectionnable
Qu'est-ce qu'un gène rapporteur ?
Les gènes rapporteurs sont des gènes qui permettent la détection ou la mesure de l'expression du gène inséré. Ces gènes rapporteurs peuvent être attachés à des séquences régulatrices du gène d'intérêt pour signaler l'emplacement ou les niveaux d'expression. Par conséquent, lors de l'expression de gènes sous le même promoteur, ils sont transcrits en une seule séquence d'ARNm puis traduits en une protéine qui peut indiquer le niveau d'expression des gènes.
Les gènes rapporteurs sont de différents types et contiennent des caractéristiques visuellement identifiables qui sont généralement impliquées dans les protéines fluorescentes et luminescentes. Les gènes qui codent les protéines et les enzymes fluorescentes convertissent les substrats invisibles en produits luminescents ou colorés en signalant l'expression génique réussie et en donnant la possibilité de quantifier l'expression génique.
Figure 02: Expression du gène rapporteur
Quelle est la différence entre un marqueur sélectionnable et un gène rapporteur ?
Marqueur sélectionnable vs gène rapporteur |
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| Le marqueur sélectionnable est une sorte de séquence d'ADN qui aide à distinguer les cellules transformées des cellules non transformées. | Le gène rapporteur est un gène qui aide à quantifier l'expression du gène désiré inséré dans la cellule hôte. |
| Nature des unités produites | |
| Les gènes sont codés avec des caractéristiques qui aident à la sélection artificielle sur les milieux de culture. | Les gènes sont codés avec des caractéristiques visuellement identifiables. |
| Utilisation | |
| Les gènes de résistance aux antibiotiques, les gènes antimétabolites, les gènes de résistance aux herbicides, etc. sont des exemples de marqueurs sélectionnables. | Les gènes codant pour la protéine fluorescente verte, la β-glucuronidase, l'acétyltransférase de chloramphénicol, la protéine fluorescente rouge, etc. sont des exemples. |
Résumé – Marqueur sélectionnable vs gène rapporteur
Les marqueurs sélectionnables permettent aux cellules transformées de se développer dans des milieux sélectifs dosés avec un antibiotique ou un herbicide particulier. Ils sont utilisés pour la sélection précoce des cellules transformées. Les gènes rapporteurs sont utilisés pour quantifier le niveau d'expression du gène souhaité inséré. Ils permettent également la différenciation des cellules transformées et non transformées. C'est la différence entre un marqueur sélectionnable et un gène rapporteur. Le marqueur sélectionnable et le gène rapporteur sont tous deux considérés comme des marqueurs importants en génie génétique.
