La principale différence entre Elisa et Elispot est qu'Elisa est un dosage immuno-enzymatique qui détermine la concentration totale de protéines de signalisation sécrétées, tandis qu'Elispot est un dosage immuno-enzymatique qui détecte les cellules individuelles sécrétant des cytokines.
Elisa et Elispot sont deux dosages immuno-enzymatiques largement utilisés en médecine, en phytopathologie, en biotechnologie et dans différentes industries pharmaceutiques. Dans ces techniques, un analyte protéique est détecté par un anticorps dirigé contre lui. Elisa est le test immuno-enzymatique le plus populaire utilisé dans les laboratoires. D'autre part, Elispot est un test immuno-enzymatique qui n'est pas utilisé à la place d'Elisa mais plutôt utilisé en plus d'Elisa dans les laboratoires.
Qu'est-ce qu'Elisa Assay ?
Elisa est un dosage immuno-enzymatique qui détermine la concentration totale des protéines de signalisation sécrétées. Il s'agit d'un test de biochimie analytique largement utilisé qui a été décrit pour la première fois par Engvall et Perlmann en 1971. Cette technique utilise un type d'immunodosage enzymatique en phase solide pour détecter la présence d'une protéine spécifique dans un échantillon liquide à l'aide d'anticorps dirigés contre cette protéine spécifique. Ce test est un outil de diagnostic couramment utilisé en médecine, en phytopathologie et en biotechnologie.
Mécanisme du test ELISA
Dans la plupart des tests ELISA, une quantité inconnue d'antigène est immobilisée sur un support solide (microplaque) au début. Ensuite, l'anticorps primaire correspondant est appliqué sur la surface du support solide. Cet anticorps forme un complexe avec l'antigène (complexe antigène-anticorps). L'anticorps primaire lié à l'antigène peut être détecté par un anticorps secondaire qui est lié à une enzyme par bioconjugaison. Dans la dernière étape du test Elisa, une substance contenant le substrat de l'enzyme est ajoutée. S'il y a une bonne liaison d'un anticorps primaire à l'antigène, un changement de couleur détectable est produit par le substrat. En fin de compte, cela quantifie l'antigène dans l'échantillon.
Figure 01: Différents types d'Elisa
De plus, il existe différentes approches d'Elisa, telles que l'Elisa directe et l'Elisa indirecte. Actuellement, divers tests Elisa sont utilisés pour détecter des agents pathogènes humains tels que Mycobacterium tuberculosis, le rotavirus, le virus de l'hépatite B, le virus de l'hépatite C, l'entérotoxine productrice d'E. coli, le VIH et le SARS-CoV-2.
Qu'est-ce que le dosage Elispot ?
Elispot est un test immuno-enzymatique qui détecte les cellules individuelles sécrétant des cytokines. Cecil Czerkinsky a décrit ELISpot pour la première fois en 1983. C'est un type de test qui se concentre sur la mesure quantitative de la fréquence de sécrétion de cytokines pour une seule cellule. Il est également classé comme une technique qui utilise des anticorps pour détecter un analyte protéique biologique ou chimique. Le test Fluorospot est une variante du test Elispot, qui utilise la fluorescence pour analyser plusieurs analytes (protéines plus secrètes).
Mécanisme du test Elispot
Dans ce mécanisme, des anticorps monoclonaux spécifiques aux cytokines sont initialement ajoutés aux puits des microplaques. Ensuite, les cellules désirées observées sont ajoutées aux puits. Plus tard, les cellules sont incubées. Pendant l'incubation cellulaire, les cellules sont autorisées à réagir à n'importe quel stimulus et à sécréter des cytokines. Les cytokines qui ont été sécrétées par les cellules incubées se fixent aux anticorps puisque les cellules sont entourées d'anticorps monoclonaux spécifiques aux cytokines.
Figure 02: Dosage Elispot
Pour détecter ces anticorps monoclonaux spécifiques de cytokines, des anticorps de détection spécifiques biotinylés sont ajoutés au puits. Les anticorps de détection spécifiques biotinylés capturent les anticorps monoclonaux spécifiques des cytokines dans les puits. De plus, des conjugués streptavidine-enzyme sont ajoutés dans les puits afin de se lier aux anticorps de détection. Dans la dernière étape, des substrats spécifiques sont ajoutés aux puits. Les réactions des conjugués enzymatiques et des substrats produisent des taches distinctes dans les puits. Ces spots distincts sont lus sur un lecteur ELISpot automatisé. En fin de compte, cela calculera davantage la fréquence de sécrétion de cytokines.
Quelles sont les similitudes entre Elisa et Elispot ?
- Ce sont tous deux des dosages immuno-enzymatiques.
- Les deux tests détectent des analytes protéiques spécifiques.
- Ces tests utilisent des anticorps spécifiques pour identifier les analytes protéiques.
- Les deux tests utilisent des enzymes et des substrats.
- Ils sont utilisés comme outil de diagnostic dans les laboratoires médicaux.
Quelle est la différence entre Elisa et Elispot ?
Elisa est un dosage immuno-enzymatique qui détermine la concentration totale des protéines de signalisation sécrétées. D'autre part, Elispot est un test immuno-enzymatique qui mesure les cellules individuelles sécrétant des cytokines. C'est donc la principale différence entre Elisa et Elispot. De plus, dans le test Elisa, l'antigène est d'abord immobilisé sur les micropuits. En revanche, dans le test Elispot, l'anticorps est d'abord immobilisé sur les micropuits. C'est donc une autre différence entre Elisa et Elispot.
L'infographie ci-dessous présente une analyse détaillée de la différence entre Elisa et Elispot sous forme de tableau.
Résumé – Elisa contre Elispot
Elisa et Elispot sont deux dosages immuno-enzymatiques largement utilisés en médecine, en phytopathologie, en biotechnologie et dans différentes industries pharmaceutiques. Elisa détecte la présence d'un ligand (protéine) dans un échantillon liquide à l'aide d'anticorps dirigés contre le ligand à mesurer. Le test Elispot est une méthode largement utilisée pour surveiller les réponses immunitaires. Il détecte les cellules individuelles sécrétant des cytokines à l'aide d'anticorps. Il s'agit à la fois d'une technique de dosage immunologique et de dosage biologique. Voici donc le résumé de la différence entre Elisa et Elispot.
