La principale différence entre ELISA compétitif et non compétitif est que l'ELISA compétitif utilise un antigène d'inhibition tandis que l'ELISA non compétitif n'utilise pas d'antigène d'inhibition pour le test.
Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) est un test immunologique qui détecte diverses cibles telles que les anticorps, les antigènes, les protéines et les glycoprotéines. C'est une méthode simple et rapide à réaliser. Par conséquent, il est plus souvent utilisé à des fins de recherche et de diagnostic. ELISA implique l'utilisation d'enzymes et la liaison spécifique d'un anticorps et d'un antigène. En fonction de la façon dont les réactions se produisent, il existe quatre types d'ELISA: ELISA direct, ELISA indirect, ELISA sandwich et ELISA d'inhibition. Les ELISA direct, indirect et sandwich sont des types d'ELISA non compétitifs, tandis que l'ELISA d'inhibition est un type d'ELISA complétif. L'objectif principal de cet article est de discuter de la différence entre ELISA compétitif et non compétitif.
Qu'est-ce que l'ELISA compétitif ?
Competitive ELISA mesure la concentration d'antigène dans un échantillon grâce à la détection d'interférences de signal. Ici, le test utilise un antigène inhibiteur. Il s'agit donc d'un type d'ELISA d'inhibition. Au cours de cette procédure, les antigènes présents dans l'échantillon entrent en compétition avec l'antigène de référence sélectionné pour se lier à une quantité spécifique d'anticorps marqué. De plus, cette procédure commence avec l'incubation de l'échantillon, avec la quantité excédentaire d'anticorps marqué. En outre, l'antigène de référence doit être pré-enduit sur une plaque de dosage à plusieurs puits. Ensuite, le mélange d'échantillons doit être ajouté à la plaque d'essai qui contient l'antigène de référence. Les anticorps libres se lieront à l'antigène de référence en fonction de la quantité d'antigène dans l'échantillon. Par conséquent, si plus d'antigène d'échantillon est présent, moins d'antigène de référence sera détecté. Ainsi, il crée un signal plus faible.
Figure 01: ELISA
En revanche, lorsque l'échantillon contient moins d'antigène, de plus en plus d'antigène de référence occupera les anticorps et donnera un signal fort. Étant donné que l'ELISA compétitif donne un signal plus fort lorsque l'échantillon contient une faible quantité d'antigènes, l'ELISA compétitif est un test très sensible, même pour les échantillons contenant un petit nombre d'antigènes.
Dans certains kits ELISA concurrents, un antigène marqué est utilisé à la place d'un anticorps marqué. Ici, l'antigène marqué et l'antigène de l'échantillon entreront en compétition pour se lier à l'anticorps primaire. De même, lorsque la quantité d'antigène dans l'échantillon est faible, la quantité d'antigène marqué qui se lie aux anticorps sera plus élevée et créera un signal plus fort.
Qu'est-ce que l'ELISA non compétitif ?
Parmi les quatre types d'ELISA, trois types sont des ELISA non compétitifs. Il s'agit de l'ELISA direct, de l'ELISA indirect et de l'ELISA sandwich. Les trois formats fonctionnent selon le principe commun d'ELISA avec de légères différences dans leurs méthodologies.
L'ELISA direct utilise un anticorps primaire marqué par une enzyme. Par conséquent, il ne nécessite pas d'anticorps secondaire. Par conséquent, l'ELISA direct est plus rapide que les autres types d'ELISA. L'anticorps primaire se liera directement à l'antigène cible immobilisé qui est présent dans la plaque. Par conséquent, la réaction enzyme-substrat aura lieu, produisant un signal visible.
Figure 02: Sandwich ELISA
Contrairement à l'ELISA direct, l'ELISA indirect utilise un anticorps primaire non marqué et un anticorps secondaire marqué par une enzyme. Une fois que l'anticorps primaire se lie à l'antigène immobilisé, l'anticorps secondaire se lie à l'anticorps primaire. L'enzyme de l'anticorps secondaire réagira avec l'antigène et produira un signal visible. Sandwich ELISA est différent à la fois direct et indirect ELISA. Ici, l'anticorps est immobilisé sur la paroi de la plaque d'essai.
Quelles sont les similitudes entre ELISA compétitif et non compétitif ?
- Les tests ELISA compétitifs et non compétitifs sont deux types de techniques de dosage d'immunosorbants.
- Ce sont des techniques très flexibles et sensibles.
- De plus, les tests ELISA compétitifs et non compétitifs sont des immunoessais enzymatiques.
- De plus, les deux méthodes génèrent un signal dû à une réaction enzyme-substrat.
Quelle est la différence entre ELISA compétitif et non compétitif ?
ELISA compétitif est un type d'ELISA qui repose sur la complétion entre l'antigène analyte et l'antigène marqué pour une quantité limitée d'anticorps spécifiques. En revanche, une telle compétition n'existe pas entre l'antigène d'intérêt et l'antigène de référence en ELISA non compétitif. C'est donc la principale différence entre ELISA compétitif et non compétitif. De même, l'ELISA compétitif est un ELISA d'inhibition tandis que l'ELISA non compétitif n'est pas un ELISA d'inhibition. Donc, c'est aussi une différence entre ELISA compétitif et non compétitif.
De plus, l'ELISA compétitif est plus adapté pour mesurer une faible quantité d'antigène d'intérêt. C'est une méthode sensible. En revanche, l'ELISA non compétitif ne dépend pas du nombre d'antigènes présents dans un échantillon. Par conséquent, il s'agit également d'une différence entre ELISA compétitif et non compétitif.
L'infographie ci-dessous explique la différence entre ELISA compétitif et non compétitif comparativement.
Résumé – ELISA compétitif vs non compétitif
Les tests ELISA compétitifs et non compétitifs sont les deux principaux types de tests ELISA ou tests immuno-enzymatiques. En résumant la différence entre ELISA compétitif et non compétitif, l'ELISA compétitif repose sur la compétition entre l'antigène d'intérêt et l'antigène de référence vis-à-vis de la quantité limitée d'anticorps. Par conséquent, ELISA compétitif est également appelé ELISA d'inhibition. D'autre part, l'ELISA non compétitif ne repose pas sur la compétition entre les antigènes cibles et les antigènes de référence. Il utilise un excès d'anticorps spécifiques marqués vis-à-vis de l'analyte d'intérêt. C'est donc la principale différence entre ELISA compétitif et non compétitif. ELISA direct, ELISA indirect et ELISA sandwich sont les trois principaux types d'ELISA non compétitif.
