Différence clé - coloration de Gram vs culture
La coloration de Gram est une technique de coloration qui est réalisée pour différencier les bactéries en deux groupes en fonction de l'épaisseur de la couche de peptidoglycane dans leur paroi cellulaire. La culture est une méthode de culture et de maintien de micro-organismes dans des conditions de laboratoire pour différentes analyses. La principale différence entre la coloration de grammes et la culture réside dans leur fonction. gram souche une technique de coloration des bactéries où la culture est une méthode de croissance et de maintien des micro-organismes.
Qu'est-ce que la coloration de Gram ?
La coloration de Gram est une importante technique de coloration différentielle utilisée pour l'identification bactérienne en microbiologie. Cette technique a été introduite par le bactériologiste danois Hans Christian Gram en 1884. La coloration de Gram classe les bactéries en deux groupes principaux: gram positif et gram négatif; ceux-ci sont très importants dans la classification et l'identification bactériennes. La coloration de Gram est effectuée comme première étape de la caractérisation bactérienne.
Les bactéries sont regroupées en fonction des différences entre leurs parois cellulaires. Les bactéries Gram positives contiennent une épaisse couche de peptidoglycane dans leur paroi cellulaire tandis que les bactéries Gram négatives contiennent une fine couche de peptidoglycane dans leur paroi cellulaire, comme le montre la figure 01. Le résultat de la coloration de Gram sera basé sur la différence d'épaisseur dans la couche de peptidoglycane du paroi cellulaire.
Figure 1: Bactéries à Gram positif et bactéries à Gram négatif
La coloration de Grams est réalisée à l'aide de quatre réactifs différents, à savoir; primaire, mordant, décolorant et contre-teinture. Le cristal violet et la safranine servent respectivement de colorant primaire et de contre-colorant, tandis que les grammes d'iode et d'alcool à 95 % servent respectivement de mordant et de décolorant.
Étapes de base de la coloration de Gram
- Un frottis bactérien est préparé sur une lame de verre propre, fixé à la chaleur et refroidi.
- Le frottis est inondé de cristal violet pendant 1 à 2 minutes.
- Le frottis est rincé à l'eau courante du robinet pour éliminer les taches en excès.
- Des grammes d'iode sont appliqués sur le frottis pendant 1 minute.
- Le frottis est rincé à l'eau du robinet qui coule lentement
- Le frottis est lavé avec de l'alcool à 95 % pendant 2 à 5 secondes et rincé à l'eau courante du robinet.
- Le frottis est contre-coloré avec de la safranine pendant 1 minute
- Le frottis est rincé à l'eau courante du robinet, séché et observé au microscope.
À la fin de la coloration de Gram, les bactéries à Gram négatif seront observées en rose tandis que les bactéries à Gram positif seront observées en violet, comme illustré à la Figure 02. Le résultat de la coloration de Gram est déterminé par l'épaisseur de la couche de peptidoglycane dans leur paroi cellulaire. Au cours de l'étape de décoloration, la coloration primaire et le mordant sont facilement éliminés des bactéries gram négatives et deviennent incolores car ils ont une fine couche de peptidoglycane. La coloration primaire est conservée dans les bactéries à Gram positif car elles ont une épaisse couche de peptidoglycane. La contre-coloration ne sera pas efficace pour les bactéries à Gram positif en raison de la rétention de la coloration primaire. Ainsi, les bactéries à Gram positif seront visibles dans la couleur primaire de la tache, c'est-à-dire la couleur violette. La contre-coloration tachera les bactéries Gram négatives et sera visible dans la couleur de sélection qui est la couleur de la safranine. Par conséquent, il est facile de classer les bactéries en deux groupes par la coloration de Gram et cela est utile pour la différenciation et l'identification bactériennes.
Figure 2: Souche Gram
Qu'est-ce que la culture ?
La culture microbienne est une méthode de culture et de maintien de micro-organismes dans des conditions de laboratoire à des fins différentes. Les cultures sont cultivées dans des milieux solides, semi-solides et liquides en fonction du type et du but de la culture du micro-organisme. Les cultures sont fournies avec les nutriments nécessaires et les conditions de croissance requises par les micro-organismes. Il existe différents composants d'un milieu de culture tels que la source d'énergie, la source de carbone, la source d'azote, les minéraux, les micronutriments, l'eau, l'agent de solidification, etc. La température, l'oxygène et le pH optimaux doivent être ajustés en fonction du type de micro-organisme cultivé.
Il existe différents types de cultures microbiennes; par exemple, culture discontinue, culture continue, culture par piqûre, culture sur plaque de gélose, culture en bouillon, etc. Selon la composition du milieu de culture, il existe différents types de milieux de culture appelés milieux synthétiques, milieux semi-synthétiques et milieux naturels. Les cultures microbiennes sont préparées dans des conditions stériles à l'intérieur d'une chambre spéciale appelée flux d'air laminaire. Le milieu de culture et la verrerie sont stérilisés avant l'inoculation du micro-organisme souhaité. Dans des conditions stériles appropriées, le micro-organisme cible est transféré dans le milieu nutritif stérilisé et incubé à une température optimale. À l'intérieur du milieu, le micro-organisme se développera et se multipliera en utilisant les nutriments fournis.
Figure 3: Une culture bactérienne sur plaque
Quelle est la différence entre la coloration de Gram et la culture ?
Gram Stain vs Culture |
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| La souche Grams est une technique de coloration différentielle utilisée pour la différenciation et l'identification bactérienne. | La culture microbienne est une méthode de culture de micro-organismes en laboratoire. |
| Composants | |
| Ceci utilise différents réactifs dont deux colorants. | Cela utilise différents milieux de culture tels que des milieux solides, semi-solides et liquides composés de nutriments et d'autres conditions nécessaires. |
| Fonctions de base | |
| Ceci permet de regrouper les bactéries en deux groupes: les grammes négatifs et les grammes positifs. | Cela permet la multiplication de micro-organismes à des fins différentes. |
| Base | |
| Le résultat de la coloration de Gram est basé sur les différences dans la couche de peptidoglycane de la paroi cellulaire. | Les micro-organismes vont se développer et se multiplier à l'intérieur du milieu de culture. |
| Résultat | |
| Les bactéries Gram négatives sont visibles en rose et les bactéries Gram positives sont visibles en violet. | Sur les plaques, on peut voir des colonies de micro-organismes. Sur les milieux liquides, les micro-organismes sont en suspension. |
Résumé - Coloration de Gram vs Culture
Les cultures microbiennes sont préparées et maintenues dans des conditions de laboratoire à différentes fins telles que le stockage, les tests, la purification chimique, etc. La coloration de Gram est une procédure de coloration qui différencie les bactéries en deux groupes principaux appelés bactéries à Gram négatif et bactéries à Gram positif. Par conséquent, la différence entre la coloration de grammes et la culture est que la coloration de grammes est une technique de coloration des bactéries tandis que la culture est une méthode de culture et de maintien des micro-organismes dans les laboratoires.
