La principale différence entre la levure un hybride et la levure deux hybride est que la levure un hybride est un test in vitro pour analyser les interactions ADN-protéine tandis que la levure deux hybride est un test in vitro pour analyser les interactions protéine-protéine.
L'étude des interactions entre les molécules cellulaires peut aider à définir les sites de reconnaissance impliqués dans l'expression des gènes et les voies des protéines. Les interactions ADN et protéines font partie intégrante des processus cellulaires tels que les modifications de l'ADN et la régulation transcriptionnelle, etc. D'autre part, les interactions protéines et protéines jouent un rôle vital dans les processus cellulaires tels que la réplication, la transcription, la traduction et la transduction du signal. Par conséquent, il est extrêmement important d'identifier ces interactions de molécules cellulaires à travers différents tests. La levure un hybride et la levure deux hybrides sont deux tests in vitro pour analyser les interactions ADN-protéine et protéine-protéine.
Qu'est-ce que Yeast One Hybrid ?
Yeast one hybrid (Y1H) est un test in vitro pour analyser les interactions intracellulaires ADN-protéine. Cette méthode a été établie pour la première fois par Wang et Reed en 1993. Depuis lors, elle a montré une plus grande puissance dans la recherche biologique. Dans ce test, il y a deux composants principaux: les appâts ADN et les proies protéiques.
Figure 01: Yeast One Hybrid
Dans la procédure, une séquence d'ADN (ADN appât) est d'abord clonée en amont de deux rapporteurs différents (HIS3, LacZ). Ces constructions rapporteurs sont intégrées dans le génome d'une souche de levure. Les facteurs transcriptionnels sont pris comme proies protéiques. Les facteurs de transcription sont fusionnés au domaine d'activation de la transcription (AD) du facteur de transcription Gal4 de levure afin de fabriquer des protéines hybrides. Cette protéine hybride entière est intégrée dans un plasmide avant de l'introduire dans la souche de levure. Après l'introduction du plasmide recombinant, lorsque le facteur transcriptionnel interagit avec le fragment d'ADN, le fragment AD active l'expression du gène rapporteur (HIS3 ou LacZ). Le séquençage des plasmides permet l'identification du facteur de transcription qui peut se lier au fragment d'ADN. Récemment, une méthode hybride de levure a été utilisée pour rechercher le diagnostic de maladies. Par conséquent, à l'avenir, ce test sera plus largement utilisé dans la recherche scientifique et les traitements médicaux.
Qu'est-ce que Yeast Two Hybrid ?
Yeast two hybrid (Y2H) est un test in vitro permettant d'analyser les protéines intracellulaires et les interactions protéiques. Cette méthode a été initialement découverte par Stanley Fields et Ok-Kyu Song en 1989. Cette technique détecte les interactions protéine-protéine en utilisant le facteur de transcription Gal4 de la levure.
Figure 02: Hybride de levure deux
Dans cette méthode, deux fusions (hybrides) sont d'abord construites en utilisant des protéines d'intérêt: en fusionnant une protéine avec le domaine de liaison à l'ADN (DBD) et en fusionnant l'autre protéine avec le domaine activateur (AD) du facteur de transcription Gal4. La protéine fusionnée avec DBD est connue sous le nom d'appât tandis que la protéine fusionnée avec AD est connue sous le nom de proie. Dans la souche de levure, lors de l'interaction de l'appât et de la proie, le DBD et l'AD sont rapprochés pour générer un facteur de transcription Gal4 fonctionnel en amont du gène rapporteur. Le facteur de transcription fonctionnel active l'expression du gène rapporteur. De plus, cette méthode est actuellement utilisée pour cribler les interactions des protéines membranaires intégrales dans les cellules de mammifères.
Quelles sont les similitudes entre Yeast One Hybrid et Yeast Two Hybrid ?
- L'hybride de levure un et l'hybride de levure deux sont deux tests in vitro pour analyser les interactions ADN-protéine et protéine-protéine.
- Ces tests utilisent des souches de levure.
- Les deux tests utilisent le domaine d'activation (AD) du facteur de transcription Gal4.
- Ils utilisent l'expression du gène rapporteur (HIS3 ou LacZ) pour détecter les interactions.
- Ils ont des appâts et des proies.
- Les deux tests sont très utiles dans la recherche biologique moderne.
Quelle est la différence entre Yeast One Hybrid et Yeast Two Hybrid ?
L'hybride de levure un est un test in vitro pour analyser les interactions ADN et protéines, tandis que l'hybride de levure deux est un test in vitro pour analyser les interactions protéines et protéines. C'est donc la principale différence entre la levure un hybride et la levure deux hybrides. De plus, dans la levure un hybride, l'appât est un fragment d'ADN et la proie est une molécule de protéine. D'autre part, dans la levure deux hybrides, l'appât et la proie sont des molécules de protéines.
L'infographie ci-dessous répertorie les différences entre la levure un hybride et la levure deux hybrides sous forme de tableau pour une comparaison côte à côte.
Résumé - Levure Un Hybride vs Levure Deux Hybride
L'hybride de levure un et l'hybride de levure deux sont deux tests in vitro importants. L'hybride de levure un est un test in vitro pour analyser les interactions ADN et protéines tandis que l'hybride de levure deux est un test in vitro pour analyser les interactions protéines et protéines. C'est donc la principale différence entre la levure un hybride et la levure deux hybrides.
