La principale différence entre HPLC et UPLC est que la HPLC permet l'analyse de particules dont la taille est d'environ 5 micromètres, tandis que l'UPLC autorise des particules beaucoup plus petites d'environ 2 micromètres.
HPLC et UPLC sont toutes deux des techniques de chromatographie liquide utiles pour séparer les composants d'un composé. Pour connaître la différence entre HPLC et UPLC, nous devons d'abord savoir ce qu'est HPLC. En effet, UPLC est une version spéciale de HPLC et nous pouvons facilement la comprendre si nous savons ce qu'est HPLC.
Qu'est-ce que la CLHP ?
Le terme HPLC signifie High Performance Liquid Chromatography. C'est une technique que nous pouvons utiliser pour séparer les différents constituants d'un composé. De plus, c'est la technique la plus largement utilisée pour identifier, quantifier et séparer les composants d'un mélange. De plus, cette technique utilise une pression élevée pour pousser les solvants à travers la colonne. De plus, les applications majeures de la HPLC sont en biochimie pour l'analyse des constituants d'un composé. C'est un moyen idéal pour la séparation et l'identification des acides aminés, des acides nucléiques, des protéines, des hydrocarbures, des pesticides, des glucides, des antibiotiques, des stéroïdes et d'innombrables autres substances inorganiques.
Figure 01: Système HPLC dans un laboratoire
En bref, le mode de fonctionnement de la technique HPLC est le suivant. Tout d'abord, nous devons introduire l'échantillon dans le flux de phase mobile en petites quantités discrètes à l'aide d'une pompe. La pression de la pompe doit être maintenue à 40 MPa. Ensuite, ce flux de phase mobile percole à travers la colonne de HPLC. De plus, les composants de l'échantillon traversent la colonne. Cependant, leurs vitesses de déplacement sont différentes les unes des autres. Cette différence est due à la différence dans les interactions entre les composants de l'échantillon et l'adsorbant à l'intérieur de la colonne. Nous appelons cet adsorbant la phase stationnaire car il réside à l'intérieur de la colonne (ne bouge pas). Deuxièmement, à la fin de la colonne, nous pouvons collecter l'échantillon qui s'élue de la colonne. Là, nous pouvons déterminer les différences de temps de rétention pour chaque composant de l'échantillon.
Qu'est-ce que l'UPLC ?
Le terme UPLC signifie Ultra High-Performance Liquid Chromatography. C'est une variante de la HPLC, mais le mode opératoire est le même. Cependant, contrairement à la HPLC, cette méthode permet d'analyser de très petites particules, telles que des particules de 2 micromètres.
Figure 02: Un périphérique UPLC
De plus, il fournit une analyse plus rapide. Dans cette technique, nous utilisons une pression de pompe de 100 MPa pour l'insertion de l'échantillon dans la colonne. Ainsi, cette haute pression confirme que tout l'échantillon est introduit dans la colonne. Ainsi, c'est très efficace par rapport à HPLC.
Quelle est la différence entre HPLC et UPLC ?
Le terme HPLC signifie High Performance Liquid Chromatography, tandis que le terme UPLC signifie Ultra High Performance Liquid Chromatography. Par conséquent, la technique UPLC est une version développée de HPLC. Ainsi, le mode opératoire est le même pour les deux techniques. Cependant, UPLC est plus efficace que HPLC car il utilise une pression de pompe élevée; la pression de la pompe pour HPLC est de 40 MPa alors qu'elle est de 100 MPa pour UPLC. Il s'agit donc d'une différence entre HPLC et UPLC. Surtout, la principale différence entre HPLC et UPLC est que la HPLC permet l'analyse de particules dont la taille est d'environ 5 micromètres, tandis que l'UPLC autorise des particules beaucoup plus petites d'environ 2 micromètres.
Résumé - HPLC vs UPLC
UPLC est une forme de HPLC. Ainsi, les méthodes de fonctionnement sont les mêmes. Mais, nous pouvons trouver des fonctionnalités améliorées dans UPLC par rapport à HPLC. Par conséquent, il existe une différence entre HPLC et UPLC. Cependant, la principale différence entre HPLC et UPLC est que la HPLC permet l'analyse de particules dont la taille est d'environ 5 micromètres, tandis que l'UPLC autorise des particules beaucoup plus petites d'environ 2 micromètres.
