La principale différence entre la microscopie à fluorescence et la microscopie confocale est qu'en microscopie à fluorescence, l'échantillon entier est inondé uniformément de lumière provenant d'une source lumineuse, alors qu'en microscopie confocale, seuls certains points de l'échantillon sont exposés à la lumière d'un source lumineuse.
La microscopie à fluorescence est une technique analytique importante qui est utile pour étudier les propriétés des substances organiques ou inorganiques. La microscopie confocale est une technique analytique utile pour augmenter la résolution optique et le contraste d'une micrographie à l'aide d'un trou d'épingle spatial pour bloquer la lumière hors foyer dans la formation de l'image.
Qu'est-ce que la microscopie à fluorescence ?
La microscopie à fluorescence est une technique analytique importante qui est utile pour étudier les propriétés des substances organiques ou inorganiques. L'instrument que nous utilisons pour cette mesure est un microscope à fluorescence. C'est un type de microscope optique. Ce type de microscope optique utilise la fluorescence au lieu de la diffusion, de la réflexion, de l'atténuation et de l'absorption ou en plus de celles-ci.
Un microscope à fluorescence utilise la fluorescence pour générer une image. Il peut s'agir d'une configuration simple comme un microscope à épifluorescence ou d'une conception plus compliquée, y compris un microscope confocal qui utilise la section optique. Cela aide à obtenir une meilleure résolution de l'image de fluorescence.
Figure 01: Un microscope à fluorescence
Lorsque l'on considère le principe de la microscopie à fluorescence, nous devons utiliser l'échantillon pour l'éclairer avec une lumière d'une longueur d'onde spécifique. Là, l'échantillon absorbe la lumière par les fluorophores, ce qui les amène à émettre de la lumière de plus grandes longueurs d'onde. Il est important de séparer la lumière éclairée de la fluorescence émise beaucoup plus faible grâce à l'utilisation d'un filtre d'émission spectrale.
Généralement, un microscope à fluorescence contient une source de lumière, un filtre d'excitation, un miroir dichroïque et un filtre d'émission. La source de lumière peut être une lampe à arc au xénon, une lampe à vapeur de mercure, des LED et des lasers. Le miroir dichroïque est également connu sous le nom de séparateur de faisceau dichroïque.
Qu'est-ce que la microscopie confocale ?
La microscopie confocale est une technique analytique utile pour augmenter la résolution optique et le contraste d'une micrographie à l'aide d'un trou d'épingle spatial pour bloquer la lumière floue lors de la formation de l'image. Elle est également connue sous le nom de microscopie confocale à balayage laser ou microscopie confocale à balayage laser. C'est une technique d'imagerie optique.
Dans cette technique microscopique, la capture de plusieurs images 2D à différentes profondeurs dans un échantillon permet la reconstruction de structures 3D au sein d'un objet. La technique microscopique confocale est largement utile dans les communautés scientifiques et industrielles. Il est généralement utilisé dans les sciences de la vie, l'inspection des semi-conducteurs et la science des matériaux.
Figure 02: Le principe du capteur de point confocal du brevet de Minsky
Pendant le processus, la lumière traverse l'échantillon sous un microscope conventionnel aussi loin dans l'échantillon qu'elle pourrait pénétrer, tandis qu'un microscope confocal qui ne focalise qu'un plus petit faisceau de lumière passe à travers un niveau de profondeur étroit à la fois. Cette technique a été développée par Marvin Minsky en 1957.
Quelle est la différence entre la microscopie à fluorescence et la microscopie confocale ?
La microscopie à fluorescence est une technique analytique importante qui est utile pour étudier les propriétés des substances organiques ou inorganiques. La microscopie confocale est une technique analytique utile pour augmenter la résolution optique et le contraste d'une micrographie à l'aide d'un trou d'épingle spatial pour bloquer la lumière hors foyer dans la formation de l'image. La principale différence entre la microscopie à fluorescence et la microscopie confocale est qu'en microscopie à fluorescence, l'échantillon entier est inondé uniformément de lumière provenant d'une source lumineuse, tandis qu'en microscopie confocale, seuls certains points de l'échantillon sont exposés à la lumière d'une source lumineuse.
L'infographie ci-dessous présente les différences entre la microscopie à fluorescence et la microscopie confocale sous forme de tableau pour une comparaison côte à côte.
Résumé - Microscopie à fluorescence vs microscopie confocale
La microscopie à fluorescence et la microscopie confocale sont deux techniques analytiques impliquées dans l'imagerie optique. La principale différence entre la microscopie à fluorescence et la microscopie confocale est qu'en microscopie à fluorescence, l'échantillon entier est inondé uniformément de lumière provenant d'une source lumineuse, tandis qu'en microscopie confocale, seuls certains points de l'échantillon sont exposés à la lumière d'une source lumineuse.
